黄独冻后培养愈伤ESTs序列和抗氧化酶的qPCR验证  

qPCR Verification of ESTs Sequence and Antioxidase of Dioscorea bulbifera L. Calli after Cryopreservation

作　　者：夏瑾华[1] 贺伟华[2] Xia Jinhua;He Weihua(College of life science, Shangrao Normal University, Shangrao, 33400 l;Institute of Microbiology, Jiangxi Academy of Sciences, Nanchang, 330096)

机构地区：[1]上饶师范学院生命科学学院,上饶334001 [2]江西省科学院微生物研究所,南昌330096

出　　处：《分子植物育种》2018年第7期2237-2243,共7页Molecular Plant Breeding

基　　金：国家自然科学基金项目(31360072);江西省教育厅2014年度科学技术研究一般项目(GJJ14712)共同资助

摘　　要：为了对黄独冻后培养胚性愈伤组织正反向SSH-ESTs序列的测序分析及其抗氧化酶进行检测,本研究对其SSH-ESTs(A1~A4以及B1~B16)以及其抗氧化酶如过氧化氢酶(CAT)、过氧化物酶(POD)、超氧化物歧化酶1(Cu Zn-SOD)和过氧化物歧化酶2(Mn-SOD)的差异表达进行q PCR验证。研究表明:与黄独胚性愈伤组织冻后光周期培养相比较,黄独冻后黑暗培养胚性愈伤组织中A-1、A-2、A-3和A-4的基因下调,表达量下降;而黄独冻后黑暗培养胚性愈伤组织中B-1、B-2、B-3、B-4、B-5、B-6、B-7、B-8、B-9、B-10、B-11、B-12、B-13、B-14、B-15和B-16的基因上调,表达量升高;同时,黄独冻后黑暗培养胚性愈伤组织的过氧化氢酶(CAT)、过氧化物酶(POD)、超氧化物歧化酶1(Cu Zn-SOD)和过氧化物歧化酶2(Mn-SOD)基因也上调,表达量也升高。本试验可为超低温保存后黑暗培养促进黄独胚性愈伤组织成活的机理提供分子依据。The differential expression of forward and reverse SSH-ESTs （A1-A4 and B 1-B 16） sequence of Dios- corea bulbifera L. embryogenic calli cultured after cryopreservation and its antioxidases （CAT, POD, CuZn-SOD, Mn-SOD） were verified by qPCR. The results showed that： Compared with Dioscorea bulbifera L. embryogenic calli cultured in the photoperiod after cryopreservation, A-1, A-2, A-3 and A-4 gene expression of Dioscorea bulbifera L. embryogenic calli cultured in the dark after cryopreservation decreased and its B-1, B-2, B-3, B-4, B-5, B-6, B-7, B-8, B-9, B-10, B-11, B-12, B-13, B-14, B-15 and B-16 gene expression increased. At the same time, catalase （CAT）, peroxidase （POD）, superoxide dismutase 1 （CuZn-SOD） and superoxide dismutase （Mn-SOD） gene expression ofDioscorea bulbifera L. embryogenic calli cultured in the dark after cryopreservation also increased. The results provide a molecular basis for the mechanism of dark culture after cryopreservation promoting their survival ofD. bulbifera L. embryogenic calli.

关 键 词：黄独 冻后培养 胚性愈伤组织 正反向SSH-EST序列 抗氧化酶 qPCR检测 

分 类 号：S567.239[农业科学—中草药栽培]