金标免疫法检测头孢氨苄残留  

作　　者：郑志强 徐雨胜 张伟[1] 王捍东[1] 

机构地区：[1]扬州大学兽医学院

出　　处：《黑龙江畜牧兽医》2018年第9期214-218,253,共6页Heilongjiang Animal Science And veterinary Medicine

基　　金：江苏高校优势学科建设工程项目(PAPD);江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心项目;江苏省高校重点实验室开放课题资助项目;扬州大学大学生科技创新基金资助项目(x20160714)

摘　　要：为了初步研制头孢氨苄胶体金免疫层析试纸条,试验采用柠檬酸三钠还原法制备不同粒径胶体金,摸索制备金标抗体的最适pH值、最适单克隆抗体标记量、金标垫中金标抗体结合量,优化玻璃纤维素膜（NC膜）中C线（羊抗鼠Ig G）与T线（CEX-OVA）喷涂量,优化了NC膜封闭液成分,并对试纸条稳定性、灵敏度、特异性进行鉴定。结果表明：金标抗体最适pH值为8.4,最适单克隆抗体标记量为每200μL胶体金溶液中加入9μL单克隆抗体,金标垫中金标抗体以1.5倍稀释,30μL/cm喷涂量效果最佳,NC膜C线、T线的最佳喷涂量分别为0.8μL/cm、0.6μL/cm,封闭液选择3%牛血清白蛋白（BSA）的0.01 mol/L碱性磷酸盐缓冲液（PBS）较合适。经鉴定,该试纸条检测限为500 ng/m L,除了与头孢拉定有轻微交叉反应外,与头孢噻呋、头孢曲松、头孢噻肟、头孢噻吩、青霉素、链霉素、四环素反应均呈阴性,可在4℃环境中稳定保持180 d。

关 键 词：头孢氨苄 胶体金 试纸条 残留检测 金标免疫法 

分 类 号：S859[农业科学—临床兽医学]