Methylocorus sp.MP 688菌株glyA基因体外表达及功能研究  

Expression and function analysis of gly A gene of Methylocorus sp.MP 688

作　　者：孙宇桐 邹琪琪 孙菊鲜 孙晓宇 齐姗姗 辛琪 葛欣[1] 

机构地区：[1]河北大学生命科学学院,河北保定071002

出　　处：《浙江农业科学》2018年第6期1010-1014,共5页Journal of Zhejiang Agricultural Sciences

基　　金：河北省自然科学基金(C2015201157;C2015201156);河北省高等学校科学技术研究项目(BJ2016008)

摘　　要：Methylocorus sp.MP 688菌株具有高产吡咯喹啉醌的特性而应用于工业生产当中。分析其全基因组及代谢通路,发现在C1固定中丝氨酸循环起到重要的生理作用。为了研究丝氨酸循环中gly A基因是否具有表达丝氨酸羟甲基转移酶(serine hydroxymethyltransferase,SHMT)活性及基因缺失是否会对菌株生命活动产生影响。采用体外表达方式,纯化并检测gly A基因产物SHMT酶是否具有催化活性。通过双交换实验进行glyA基因敲除,探究gly A基因缺失是否会对菌株产生影响。结果表明,gly A基因成功在体外表达,双交换敲除实验证明glyA基因作为关键基因存在,其缺失或可致死。此外,SHMT酶在35℃,pH值7.5缓冲体系中酶促效率最高,还原剂β-巯基乙醇对SHMT酶催化活性具有促进作用。

关 键 词：glyA基因 丝氨酸羟甲基转移酶 体外表达 双交换敲除 

分 类 号：Q78[生物学—分子生物学]