射干内生真菌SRAP-PCR反应条件的优化  

作　　者：罗琴 赵欢[1] 彭正松 刘小红[1] 钟钒 邓迪 谭秀梅 

机构地区：[1]西华师范大学生命科学院,四川南充637009 [2]西昌学院,四川西昌613015 [3]成都七中嘉祥外国语学校,四川成都610023

出　　处：《时珍国医国药》2018年第6期1447-1450,共4页Lishizhen Medicine and Materia Medica Research

基　　金：西华师范大学博士启动基金(15E025);四川省教育厅重大培育项目(15CZ0015);四川省教育厅创新研究团队项目(16TD0020);西华师范大学2017年全国大学生创新创业项目(201710638008)

摘　　要：以从射干中分离纯化出的96株内生真菌DNA为研究对象,采用单因素试验设计,对影响SRAP-PCR反应的DNA模板、Mg2+、d NTPs、Taq DNA聚合酶和引物对浓度进行了优化,以确定适合射干内生真菌的SRAP-PCR反应最佳反应体系。结果表明,建立的射干内生真菌最佳反应体系为20μL,反应体系中含10×PCR buffer(不含Mg2+)2.0μL,DNA模板50 ng,Mg2+浓度为2.5mmol·L-1,d NTPs为0.5 mmol·L-1,引物1.0μmol·L-1,Taq DNA聚合酶1.5U。利用该反应体系从90对引物中筛选出可扩增清晰、稳定性好条带的引物38对。该体系为今后利用SRAP分子标记技术开展射干内生真菌的分子遗传学研究奠定基础。

关 键 词：射干 内生真菌 相关序列扩增多态型标记 单因素优化 

分 类 号：R285.5[医药卫生—中药学]