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作 者:陈献华[1] 林万敏[1] 孙凯华[1] 黄嘉[1] 汪凌[1] 徐平[1]
机构地区:[1]复旦大学生命科学院基因生理学研究室,脑研究中心,立人实验室,上海200433
出 处:《中国免疫学杂志》2002年第10期682-686,共5页Chinese Journal of Immunology
基 金:国家自然科学基金资助项目 (批准号 3 0 0 70 2 42 )
摘 要:目的 :制备用于检测人胚胎组织Tra2α蛋白的特异抗体。方法 :选择Tra2α中特有的一段编码序列 (第 5 2~ 16 5位核苷酸 ) ,通过克隆至pGEX 3x表达载体形成GST融合基因 ,并以诱导表达和纯化的该融合蛋白为抗原免疫新西兰兔 ,获得了抗Tra2α的血清。结果 :免疫印迹 (Westernblot)检测结果显示 ,该血清能特异地与人胎脑组织中的Tra2α蛋白结合。免疫组织化学结果显示 ,该血清能用于人胎脑组织中Tra2α蛋白分布的检测。结论 :所制备的抗血清具有很好的特异性 ,可用于人胚胎组织中Tra2α蛋白的检测。Objective:To prepare specific antibody against the pre mRNA splicing protein Tra2α in human fetal tissues.Methods:A specific antigen fragment of human Tra2α was cloned into the pGEX 3x expression vector to express a recombinant GST Tra2α fusion protein.The fusion protein was expressed,purified and used as an antigen to immunize the New Zealand rabbit,and the polyclonal antibody to Tra2α was obtained.Results:The antibody was successfully used to detect Tra2α protein in human fetal cerebrum with Western blot and immunohistochemistry analysis.Conclusion:This prepard antibody has good specificity and can be used to detect the Tra2α protein in the human fetal tissues.
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