褐苞薯蓣ISSR-PCR反应体系的建立与优化  

Establishment and optimization of ISSR-PCR reaction system of Dioscorea persimilis

作　　者：高慧新 封毅[1] 王孝勋[1] 吴燕春[1] 戴忠华[1] 田慧[1] 

机构地区：[1]广西中医药大学,广西南宁530200

出　　处：《江苏农业科学》2018年第19期43-45,共3页Jiangsu Agricultural Sciences

基　　金：广西中医药大学2015年度中药学优势学科建设课题(编号:ZYX2015001);2017年杨世林教授团队骨干学员科研项目(编号:CS17012);壮瑶药协同创新中心项目(编号:桂教科研[2013]20号);广西壮瑶药重点实验室项目(编号:桂科基字[2014]32号);广西重点学科壮药学项目(编号:桂教科研[2013]16号);广西八桂学者中药创新理论与药效研究项目(编号:J13162)

摘　　要：通过单因素考察结合正交试验的方法,基于反应体系中Taq DNA聚合酶量、DNA模板用量、dNTPs浓度、引物浓度、Mg^(2+)浓度等因素对简单重复序列间扩增(ISSR)反应体系进行优化。结果表明,褐苞薯蓣ISSR-PCR的20μL最佳反应体系为Taq DNA聚合酶1. 875 U,DNA模板量52. 5 ng,d NTPs浓度0. 25 mmol/L,引物浓度0. 437 5μmol/L,Mg^(2+)浓度1. 5 mmol/L,10×Taq Buffer 2. 0μL,其余用dd H_2O补齐。

关 键 词：褐苞薯蓣 简单重复序列间扩增(ISSR) 单因素试验 正交设计 

分 类 号：S632.101[农业科学—蔬菜学]