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作 者:杜兵帅 胡海文 曹庆芹 秦岭 房克凤[1,4] DU Bing-shuai;HU Hai-wen;CAO Qing-qin;QIN Ling;FANG Ke-feng(College of Landscape Architecture,Beijing University of Agriculture,Beijing 102206;Beijing Key Laboratory for Agricultural Application and New Technique/College of Plant Science and Technology,Beijing University of Agriculture,Beijing 102206;Beijing Collaborative Innovation Center for Eco-Environmental Improvement with Forest and Fruit Trees,Beijing 102206;Liucun Township People’s Government of Changping District of Beijing Municipality,Beijing 102204,China)
机构地区:[1]北京农学院园林学院,北京102206 [2]北京市昌平区流村镇人民政府,北京102204 [3]北京农学院植物科学技术学院/农业应用新技术北京市重点实验室,北京102206 [4]北京林果业生态环境功能提升协同创新中心,北京102206
出 处:《电子显微学报》2018年第6期627-636,共10页Journal of Chinese Electron Microscopy Society
基 金:国家自然科学基金资助项目(No.31270719);科技创新服务能力建设-协同创新中心-林果业生态环境功能提升协同创新中心(No.CEFF-PXM2017_014207_000024);北京市属高等学校创新团队建设与教师职业发展计划项目(No.IDHT20180509)
摘 要:本文以成熟的青杄花粉为试验材料,用不同浓度钙拮抗剂EGTA和抑制剂AlCl_3进行处理,观察花粉的萌发和花粉管的生长情况,同时用选择性电极测定了不同发育时间内花粉管顶端钙离子流,以及EGTA和AlCl_3对钙离子流的影响,以探讨钙对青杄花粉生长发育的调控机制。结果发现:(1) 0.5 mmol·L^(-1) EGTA处理花粉后,会促进花粉萌发,萌发率升高;但花粉管长度低于对照组;1 mmol·L^(-1) EGTA处理后,花粉萌发率和花粉管长度都低于对照组;0.1 mmol·L^(-1)和0.5 mmol·L^(-1) AlCl_3处理后,花粉萌发率和花粉管长度都会显著降低;(2)通过非损伤微测技术发现,对照花粉在水合时期(培养3,6,9 h)钙离子外流,在萌发及快速伸长期钙离子内流(培养12,15,18 h);EGTA和AlCl_3培养花粉后,花粉的水合期、萌发期和花粉管的伸长期的钙流状况会出现异常,其中包括钙流的内流和外流的状况以及流速,从而导致各个时期花粉的萌发率及和花粉管长度的改变,导致花粉管的生长异常。(3)对照花粉管顶端出现Ca^(2+)浓度梯度,而0.5 mmol·L^(-1) EGTA处理的花粉会相比对照组提前在花粉管顶端出现Ca^(2+)浓度梯度,以促进花粉萌发;1 mmol·L^(-1 )EGTA,0.1 mmol·L^(-1) AlCl_3和0.5 mmol·L^(-1) AlCl_3处理后Ca^(2+)浓度梯度消失。由此表明花粉的不同生长时期对钙离子的需求不同,且钙离子对花粉管的萌发及生长起着至关重要的作用。In the present study,mature Picea wilsonii Mast pollen was chosen to study the regulatory mechanism of Ca^2+on pollen growth and development.EGTA and AlCl3 with different concentrations were added to the media at the beginning.Meanwhile,dynamics of calcium influx and efflux were studied by microelectrodes and[Ca^2+]c was observed with lasing confocal scanning microscopy.The results show that:(1)0.5 mmol·L^-1 EGTA stimulates pollen germination,but inhibits pollen tube elongation.1 mmol·L^-1 EGTA and AlCl3 inhibit pollen germination.(2)Calcium fluxes are observed during pollen hydration,germination and tube growth,and EGTA and AlCl3 affect calcium fluxes.(3)[Ca^2+]gradient exists in control pollen tubes.However,EGTA and AlCl3 with different concentrations have different effects on the gradient.In a word,pollen has different requirements for calcium ions during different developmental stages,and calcium plays a crucial role during pollen hydration,germination and tube growth.
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