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机构地区:[1]广西中药质量标准研究重点实验室/广西壮族自治区中医药研究院,广西南宁530022
出 处:《中药材》2018年第8期1990-1994,共5页Journal of Chinese Medicinal Materials
基 金:广西自然科学青年基金项目(2015GXNSFBA139181);广西中药质量标准研究重点实验室系统性研究项目(桂中重系201603);广西科技计划项目基地和人才专项(桂科AD17195002)
摘 要:目的:体外筛选出厚叶南五味子逆转肝纤维化作用的最佳活性部位,并对其化学成分进行解析。方法:厚叶南五味子经天然药物化学方法提取得到石油醚、乙酸乙酯、正丁醇和水层共4个部位,采用CCK-8法检测不同溶剂提取物对大鼠肝星状细胞HSC-T6的增殖作用、ELISA法检测不同溶剂提取物对细胞外基质(Extracellular matrix,ECM)成分的影响,从中筛选出逆转肝纤维化活性最佳的部位。Western blot检测最佳活性部位处理细胞后磷酸化c-jun氨基端激酶(P-JNK)和磷酸化丝裂原活化蛋白激酶(P-p38)的含量;流式细胞术检测细胞凋亡率;采用气相-质谱(GC-MS)方法对该活性部位进行解析。结果:厚叶南五味子石油醚部位对HSC-T6细胞的增殖抑制作用最强,IC_(50)为35.73μg/mL;进一步筛选显示石油醚部位可显著降低细胞外基质成分Ⅰ型胶原(Col-Ⅰ)、Ⅲ型前胶原氨基端肽(PⅢNP)、Ⅳ型胶原(Col-Ⅳ)的表达;厚叶南五味子石油醚部位作用后,HSC-T6细胞磷酸化JNK、p38蛋白表达较空白对照组显著降低(P<0.01),细胞凋亡率显著升高(P<0.05);从厚叶南五味子石油醚部位中分离出27个成分,并鉴定出其中20个成分,主要成分为石竹烯(25.329%)、δ-杜松烯(13.211%)和β-石竹烯(10.076%)。结论:厚叶南五味子石油醚部位具有较好的逆转肝纤维化活性,其作用机制与抑制磷酸化JNK、p38表达及诱导细胞凋亡有关,石竹烯、δ-杜松烯及β-石竹烯可能是其发挥逆转肝纤维化作用的物质基础。
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