OsRhoGDI2过表达转基因水稻的筛选鉴定及外源基因拷贝数的初步分析  

Screening and identification of OsRhoGDI2 overexpressed transgenic rice and preliminary analysis of copy number of foreign gene

作　　者：杜京尧 尚飞[1] 王高华[1] 梁卫红[1] Du Jingyao

机构地区：[1]河南师范大学生命科学学院

出　　处：《江苏农业科学》2019年第14期50-54,共5页Jiangsu Agricultural Sciences

基　　金：国家自然科学基金(编号:31171182、U1704101);河南省高校科技创新团队支持计划(编号:15IRTSTHN020)

摘　　要：水稻RhoGDP解离抑制基因OsRhoGDI2是从幼穗中分离出的功能未知基因.为鉴定该基因的功能,笔者所在实验室前期构建了植物过表达载体pCAMBIA1302-OsRhoGDI2-GFP,并对水稻进行了遗传转化.对OsRhoGDI2过表达转基因水稻T2代进行筛选和鉴定,采用PCR技术鉴定转基因植株,采用半定量RT-PCR和实时荧光定量PCR检测OsRhoGDI2在转基因水稻中的表达水平,结果显示,其中6个株系为过表达转基因植株,OsRhoGDI2表达水平上调1.69~13.35倍.为检测外源基因在转基因水稻中的拷贝数,分别以蔗糖磷酸合成酶基因SPS和潮霉素抗性基因HYG为内参基因和标记基因,采用实时荧光定量PCR(qPCR)技术结合内参基因和标记基因的标准曲线进行分析,结果显示在所检测的6个转基因株系中,外源基因的拷贝数均为1,提示已经获得稳定遗传的OsRhoGDI2过表达转基因水稻,为后续OsRhoGDI2基因的功能研究奠定基础.

关 键 词：OsRhoGDI2 转基因水稻 表达分析 拷贝数 外源基因 

分 类 号：S511.03[农业科学—作物学]