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作 者:陈兰艳 马秀花 唐楠[1] 侯志强 巨秀婷 Chen Lanyan;Ma Xiuhua;Tang Nan;Hou Zhiqiang;Ju Xiuting(Key Laboratory of Qinghai Province for Landscape Plants Research,Agriculture and Animal Husbandry College,Qinghai University,Xining,810016)
机构地区:[1]青海大学农牧学院青海省园林植物与观赏园艺重点实验室
出 处:《分子植物育种》2019年第20期6711-6717,共7页Molecular Plant Breeding
基 金:国家自然科学基金(31660582);2016年青海省园林植物研究重点实验室专项资金项目共同资助
摘 要:本研究以郁金香嫩叶为实验材料,采用L16(45)正交设计实验和单因素浓度梯度筛选实验两种方法对影响郁金香SRAP-PCR反应体系的主要影响因素Mg2+、dNTPs、Taq酶、引物和模板DNA进行优化,以期建立适用于郁金香的SRAP-PCR反应体系。研究表明20μL的PCR反应体系中Mg2+2.0 mmol/L、dNTPs0.2 mmol/L、Taq酶1.5 U、引物0.2μmol/L、模板DNA 80 ng。用建立的最优体系从100对SRAP引物组合中筛选出43对针对郁金香材料扩增效果良好的引物组合。该研究结果为SRAP分子标记技术在郁金香遗传多样性分析、品种鉴定、DNA指纹图谱建立等方面的运用提供一定的技术参考。In order to establish the SRAP-PCR reaction system apply to tulip, the young leaves of tulip was as experimental materials, L16(45) orthogonal design test and single factor concentration gradient screening methods were used to optimize the concentration of five important factors of tulip SRAP system, Mg2+, dNTPs, Taq polymerase, primers, and template DNA. The experimental results showed that Mg2+2.0 mmol/L, dNTPs 0.2 mmol/L, Taq polymerase 1.5 U, primers 0.2 μmol/L, template DNA 80 ng included in a 20 μL reaction system. 43 pairs of primer combinations were screened out from 100 pairs of primer combinations with the established optimal system, providing some technical reference for the application of SRAP molecular marker technique in genetic diversity analysis, variety identification, establishment of DNA fingerprinting for tulip.
关 键 词:郁金香(Tulipa gesneriana L.) SRAP 体系建立
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