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作 者:李晖[1] 张泽凤 杨超[3] 林俊芝 赵梓亦[1] 陈昌金[1] LI Hui;ZHANG Zefeng;YANG Chao
机构地区:[1]成都中医药大学附属医院中心实验室,四川成都610072 [2]成都中医药大学临床医学院,四川成都610072 [3]广东省中医院,广东广州510120
出 处:《福建中医药》2019年第6期25-29,共5页Fujian Journal of Traditional Chinese Medicine
摘 要:目的研究温阳健脾祛痰颗粒(WYJPQT)含药血清对非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)细胞模型的影响,初步探讨其作用机制。方法 0.25 mM油酸诱导HepG2细胞24 h,油红O染色和三酰甘油检测确定NAFLD细胞模型成功建立,将NAFLD细胞模型分为WYJPQT高、中、低剂量组,阳性对照组及模型组,同时设置空白对照组。随后进行含药血清的制备,WYJPQT高、中、低剂量组分别给予10%WYJPQT高、中、低剂量组含药血清培养基孵育48 h,阳性对照组给予10%多烯磷脂酰胆碱含药血清培养基孵育48h,模型组和空白对照组给予10%大鼠血清培养基孵育48 h后,进行油红O染色,细胞内三酰甘油含量测定,并应用逆转录-实时荧光定量PCR法(RTqPCR)和蛋白印迹法(Western blot)分别检测Toll样受体4(TLR4)、髓样分化因子88(MYD88)、Toll样白介素-1受体结构域适配子诱导干扰素-b(TRIF)和核因子κB(NF-κB)mRNA和蛋白表达水平。结果含药血清干预48h后,油红O染色提示WYJPQT高、中、低剂量组降低TG的作用细胞内脂滴颗粒较模型组减少,TG含量较模型组明显降低(P<0.05),低剂量组与阳性对照组相当(P>0.05);高、中剂量组TRIF蛋白相对表达量较模型组明显减少(P<0.01),高剂量组TRIF蛋白表达量与阳性对照组相当(P>0.05);WYJPQT各剂量组NF-κB m RNA和蛋白相对表达量均较模型组显著减少(P<0.01);WYJPQT高、中剂量组TLR4 m RNA相对表达量较模型组和阳性对照组明显降低(P<0.05)。结论 WYJPQT含药血清可调控TLR4/TRIF/NF-κB信号通路,降低NAFLD细胞模型中的脂滴颗粒数量,减少TG含量,达到对NAFLD细胞模型的治疗作用。
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