家兔β干扰素启动子质粒的构建及其启动子活性鉴定  被引量:2

Construction of rabbit interferon-β promoter plasmid and identification of its promoter activity

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作  者:陈萌萌[1] 范志宇[1] 胡波[1] 宋艳华[1] 魏后军[1] 仇汝龙 朱伟峰 徐为中[1] 王芳[1] Chen Mengmeng

机构地区:[1]江苏省农业科学院兽医研究所/农业农村部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室/国家兽用生物制品工程技术研究中心

出  处:《江苏农业科学》2019年第23期78-81,共4页Jiangsu Agricultural Sciences

基  金:国家自然科学基金(编号:31702274);现代农业产业技术体系建设专项资金(编号:CARS-43-C-1)

摘  要:通过家兔体内感染兔出血症病毒(RHDV)后发现体内干扰素-β(Interferon-β,IFN-β)基因表达水平明显降低。为体外研究RHDV感染宿主后IFN-β启动子的调控机制,首先以家兔肝细胞总cDNA为模板,利用PCR扩增IFN-β基因启动子区的序列,经测序确定全长为550bp;预测软件分析,与人源IFN-β基因启动子的转录上调区域(positive regulation domain,PRD)高度同源;随后将启动子全长和一系列转录元件克隆至pGL6-Basic荧光素酶表达载体中,成功构建重组体报告基因质粒后,瞬转RK-13细胞,利用试剂盒检测荧光素酶的相对活性。结果显示,克隆的IFN-β基因启动子区和AP-1、IRF3、NF-κB和IRF7等转录元件具有显著的活性,为研究兔出血症病毒对宿主IFN-β基因的转录调控机制提供了有效的工具。

关 键 词:家兔 兔出血症病毒 IFN-β基因 启动子 荧光素酶 转录调控 

分 类 号:S858.291[农业科学—临床兽医学]

 

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