夹心ELISA检测N端利用物因子A(NusA)标签融合蛋白  

作　　者：李娜 国航 吴浩杰[3] 魏贤 陆艳[3] 于少娟[3] 

机构地区：[1]空军军医大学第一附属医院输血科,陕西西安710002 [2]空军军医大学基础医学院学员四大队,陕西西安710032 [3]西安市第一医院心血管病医院,陕西西安710002

出　　处：《细胞与分子免疫学杂志》2019年第11期1020-1022,共3页Chinese Journal of Cellular and Molecular Immunology

基　　金：国家科技支撑计划(2015BAK45B01)。

摘　　要：目的创建基于夹心ELISA原理的定性和定量检测N端利用物因子A(NusA)标签融合蛋白的方法,为NusA标签融合蛋白的鉴定提供新的手段。方法以NusA标签蛋白作为免疫原免疫BALB/c小鼠,制备特异性识别NusA标签蛋白的单克隆抗体(mAb),常规标记辣根过氧化物酶,方阵法筛选夹心ELISA的配对抗体。结果获得14株NusA标签蛋白特异性mAb并最终确定一对可用于夹心ELISA检测的NusA特异性mAb。以NusA No.1作为捕获抗体,NusA No.10为检测抗体。结论成功建立双抗体夹心ELISA检测NusA标签融合蛋白的方法,检测敏感度可达1.5 ng/mL。

关 键 词：重组蛋白 N端利用物因子A(NusA) 单克隆抗体 ELISA 

分 类 号：R446.6[医药卫生—诊断学] R392-33[医药卫生—临床医学]