鉴别犬瘟热病毒强弱毒株中和单克隆抗体的制备  

Preparation of neutralizing monoclonal antibody for distinguishing virulent and attenuated canine distemper virus strains

作　　者：毕振威[1] 徐立波 夏兴霞[1] 梁霆 王永山[1] Bi Zhenwei

机构地区：[1]江苏省农业科学院兽医研究所/农业部兽用生物制品工程技术重点实验室/国家兽用生物制品工程技术研究中心,江苏南京210014 [2]山东省招远市农业农村局,山东招远265400 [3]江苏省农业农村厅,江苏南京210036

出　　处：《江苏农业科学》2020年第20期178-182,共5页Jiangsu Agricultural Sciences

基　　金：国家重点研发计划(编号:2016YFD0501000);国家自然科学基金(编号:31802168)。

摘　　要：为了制备鉴别犬瘟热病毒(CDV)流行强毒株和疫苗弱毒株的单克隆抗体,将CDV 851弱毒株浓缩后经蔗糖密度梯度离心纯化,免疫BALB/c小鼠,取免疫小鼠脾细胞与SP2/0瘤细胞进行细胞融合,经3~5次克隆,间接ELISA筛选,获得稳定分泌抗CDV的杂交瘤细胞2D12株。该细胞株分泌的单克隆抗体亚类为IgG1κ,与常见犬病毒不发生交叉反应。间接免疫荧光显示,单克隆抗体与CDV 851毒株发生特异性反应,与杆状病毒表达的CDV 851毒株H蛋白发生特异性反应。Western blot检测发现,单克隆抗体与2株CDV强毒株H蛋白不发生反应,而与2株CDV弱毒株H蛋白有特异性反应。双抗体夹心ELISA显示,单克隆抗体能检测CDV疫苗弱毒株而不能检测CDV强毒株。病毒中和试验证实,单克隆抗体对CDV 851弱毒株具有中和能力。制备了区分CDV强毒株和疫苗弱毒的单克隆抗体,为CDV的鉴别诊断技术研究奠定了基础。

关 键 词：犬瘟热病毒 单克隆抗体 流行毒株 疫苗毒株 鉴别检测 

分 类 号：S852.65[农业科学—基础兽医学]