miRNA-126下调细胞骨架调控蛋白Twinfilin-1对心肌细胞肥大的抑制效应  

作　　者：徐晓东[1] 李慎 陈亚锋[1] 王庆涛 田卫中 

机构地区：[1]荆门市第一人民医院心血管内一科,湖北荆门448000 [2]武汉大学基础医学院

出　　处：《中国老年学杂志》2020年第22期4846-4850,共5页Chinese Journal of Gerontology

基　　金：湖北省自然科学基金重点类项目(2014CFB471)。

摘　　要：目的探讨miRNA-126下调细胞骨架调控蛋白Twinfilin-1(Twf1)对心肌细胞肥大的抑制效应。方法通过内皮素(ET)-1人工诱导原代培养新生大鼠健康心肌细胞形成心肌细胞肥大,以实时定量PCR检测miRNA-126和心肌细胞肥大标志性基因的表达量,利用化学修饰RNA模拟物转染法使miRNA-126过表达,利用重组腺病毒转染使Twf1过表达。以抗α-辅肌动蛋白(actinin)荧光染色法测量细胞表面积,以Western印迹法检测Twf1和心肌肌钙蛋白(cTn)I的蛋白表达量,荧光素活性检测实验判定miRNA-126与Twf1的3′端非编码区(UTR)嵌和。结果肥大心肌细胞的miRNA-126表达量显著低于健康心肌细胞(P<0.01)。miRNA-126干预后肥大心肌细胞表面积明显缩小(P<0.01)。miRNA-126模拟物转染组心肌细胞肥大标志性基因心房钠尿肽(ANP)、α-actinin、Myh6、Myh7相对表达量均显著低于空白心肌细胞组(P<0.01)。miRNA-126模拟物与Twf1的3′-UTR核心序列重组体共反应组的相对荧光表达显著低于内对照载体组(P<0.01)。miRNA-126组Twf1蛋白相对表达量显著低于空白心肌细胞组和错义miRNA(scr-miRNA)转染组(P均<0.01)。miRNA-126模拟物转染组心肌细胞磷酸化cTnI蛋白表达量显著低于空白心肌细胞组和scr-miRNA转染组(P均<0.01);各组间cTnI蛋白表达量的差异无显著性(P均>0.05)。结论miRNA-126具有心肌肥大抑制效应,调节方式为下调Twf1基因表达抑制cTnI的磷酸化。

关 键 词：miRNA-126 心肌细胞肥大 细胞骨架调控蛋白 心肌肌钙蛋白I 

分 类 号：R322.1[医药卫生—人体解剖和组织胚胎学]