三种犬呼吸道常见病毒多重PCR检测方法建立  

作　　者：俞向前 闫洁新 文德亮 郭志波 陈琦[4] 潘世友 刘广庆 朱建国[2] 叶承荣 

机构地区：[1]浦东新区动物疫病预防控制中心,上海201299 [2]上海交通大学农业与生物学院,上海200240 [3]上海市浦东新区川沙新镇集体资产管理事务中心,上海201202 [4]上海市动物疫病预防控制中心,上海201103 [5]上海喜乐缘宠物用品有限公司,上海201299 [6]上海元和利宠宠物诊疗有限公司,上海201210

出　　处：《上海畜牧兽医通讯》2020年第6期2-5,共4页Shanghai Journal of Animal Husbandry and Veterinary Medicine

基　　金：浦东新区科技发展基金民生科技项目“犬传染性呼吸系统疾病重要病原感染流行及其诊治技术研究”(PKJ2018-N04)。

摘　　要：为建立犬呼吸道冠状病毒(Canine respiratory coronavirus,CRCoV)、犬细小病毒(Canine parvovirus,CPV)、犬瘟热病毒(Canine distemper virus,CDV)3种病毒的多重PCR方法,根据GenBank中CRCoV、CPV和CDV的基因序列,进行BLAST同源性分析,找出保守序列,并根据保守序列对每个病毒设计引物,建立扩增3种病毒的多重PCR方法,并通过已建立的方法对收集的呼吸道病犬病料进行检测。结果表明,所建立的三重PCR体系组成为2×Taq Mix 12.5μL,3对上、下游引物各0.6μL,混合模板1μL,ddH 2 O 7.9μL;扩增程序为94℃5 min;94℃30 s,54℃1 min,72℃24 s,共35个循环;72℃8 min。该方法具有较高的灵敏性和特异性。临床验证实验表明,本实验所建立的多重PCR方法可用于临床诊断。

关 键 词：犬呼吸道冠状病毒 犬细小病毒 犬瘟热病毒 多重PCR方法 

分 类 号：S858.292[农业科学—临床兽医学]