补阳还五汤含药血清对TGF-β1诱导的人肺动脉内皮细胞Dll4/Notch4信号的调控作用  

Regulation of Serum Containing Buyang Huanwu Decoction on Dll4/NOTCH4 Signal Induced by TGF-β in Human Pulmonary Artery Endothelial Cells

作　　者：渠景连 赵惠亮 杨邯捷 郭永胜 QU Jinglian;ZHAO Huiliang;YANG Hanjie;GUO Yongsheng

机构地区：[1]贵州中医药大学,贵州贵阳550025

出　　处：《江苏中医药》2021年第1期73-77,共5页Jiangsu Journal of Traditional Chinese Medicine

基　　金：国家自然科学基金项目(81660789);贵州省教育厅青年科技人才成长项目(黔教合KY字〔2017〕177);贵州中医药大学博士启动基金项目。

摘　　要：目的:观察补阳还五汤含药血清对转化生长因子(TGF)-β1诱导的人肺动脉内皮细胞(HPAEC)Dll4/Notch4信号的调控作用。方法:以53.36 g/(kg·d)剂量灌胃家兔,制备补阳还五汤含药血清,等容积生理盐水灌胃制备空白血清。体外培养HPAEC细胞,TGF-β1诱导建立内皮间质转化(EndMT)模型,设立空白组(10%空白血清)、模型组(10%空白血清+TGF-β1)、DAPT组(10%空白血清+DAPT+TGF-β1)、10%含药血清组(10%含药血清+TGF-β1)、5%含药血清组(5%含药血清+5%空白血清+TGF-β1)和2.5%含药血清组(2.5%含药血清+7.5%空白血清+TGF-β1)6组。采用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)法检测各组HPAEC细胞Notch4、Dll4和CBF1 mRNA的表达,采用蛋白质免疫印迹(Western blot)法检测各组HPAEC细胞Notch4、Dll4和CBF1蛋白的表达,采用免疫共沉淀(Co-IP)法检测各组HPAEC细胞NICD4与CBF1的相互作用。结果:与空白组比较,模型组HPAEC细胞Notch4、Dll4和CBF1 mRNA及蛋白表达均显著升高(P<0.01),且NICD4与CBF1有结合作用;与模型组比较,DAPT组和补阳还五汤各剂量含药血清组HPAEC细胞Notch4、Dll4和CBF1 mRNA及蛋白表达均降低,NICD4与CBF1的结合被抑制,随着含药血清浓度的增加,作用越明显。结论:补阳还五汤含药血清可抑制TGF-β1诱导的HPAEC细胞的Dll4/Notch4信号,这可能是其干预内皮间质转化的机制之一。

关 键 词：补阳还五汤 特发性肺纤维化 内皮细胞 肺动脉 细胞株 内皮间质转化 新西兰兔 实验研究 

分 类 号：R289.5[医药卫生—方剂学]