绵羊FHL2蛋白原核表达、蛋白纯化及多克隆抗体的制备  

作　　者：聂晓宁 李闰婷[1] 陈龙欣[1] 李玉华[1] 聂文营 张丽萌[1] 王林青[1] 

机构地区：[1]郑州师范学院分子生物学实验室,河南郑州450044

出　　处：《畜禽业》2021年第1期3-4,共2页Livestock and Poultry Industry

基　　金：河南省高等学校重点科研项目计划(21A180027);河南省高等学校青年骨干教师培养计划(2018GGJS161);郑州师范学院大学生创新创业训练计划项目(DCY2020020)。

摘　　要：通过表达和纯化重组的绵羊FHL2抗原蛋白和制备其多克隆抗体,用于研究该蛋白的生物学功能及绵羊繁殖调控的作用机制。研究采用PCR技术扩增绵羊FHL2蛋白的编码序列,利用限制性内切酶双酶切后插入pET28a-sumo中,加入0.5 M IPTG诱导蛋白表达,利用Ni-NTA纯化获得48 ku的重组FHL2蛋白。以重组FHL2蛋白为抗原,混合佐剂皮下注射免疫BALB/c小鼠,获得抗FHL2的多克隆抗体,间接ELISA检测结果显示抗体效价达到16400。通过转染pEGFP-C1-FHL2质粒至HEK 293F细胞,提取细胞总蛋白,利用制备的抗FHL2多克隆抗体检测蛋白的结合力,具有良好的免疫原性,为研究FHL2蛋白的生物学功能及繁殖调控机制提供良好的基础材料。

关 键 词：绵羊 FHL2基因 原核表达 蛋白纯化 多克隆抗体 

分 类 号：S85[农业科学—兽医学]