基因片段扫描检测T细胞受体多样性运用于益艾康胶囊治疗艾滋病的效果观察  

Clinical Observation of Yiaikang on Aids Appling T Cell Repertoire Diversity Detection by Genescan

作　　者：李杰[1] 桑锋[1] 邓博文[1] 岳静宇[1] 李强[1] 郭会军[1] Li Jie;Sang Feng;Deng Bowen;Yue Jingyu;Li Qiang;Guo Huijun(不详)

机构地区：[1]河南中医药大学第一附属医院艾滋病临床研究中心,河南省病毒性疾病中医药防治重点实验室,河南郑州450000

出　　处：《中医研究》2021年第2期12-17,共6页Traditional Chinese Medicinal Research

基　　金：河南省科技攻关项目(202102310503,202102310178,182102310312);河南省中医药防治艾滋病专项课题(2019AZB005,2019AZB008);河南省高等学校重点科研项目(18A360013);河南中医药大学科研苗圃工程项目(MP2017-25);河南省中医管理局国家中医临床研究基地专项课题(2017JDZX041);河南中医药大学特色学科中医学学科建设项目(STS-ZYX-2017019);国家科技重大专项(2017ZX10205502002,2017ZX10205502003);河南省中医药科学研究专项课题(20-21ZYZD03)。

摘　　要：目的:利用基因片段扫描建立检测T细胞受体(T cell receptor,TCR)β链多样性的方法,并探讨运用其观察益艾康胶囊治疗艾滋病疗效的效果。方法:①收集17例健康者外周血液样本,提取基因组DNA,设计多重荧光引物,采用聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)分别扩增TCRβ链互补决定区3(CDR3)的2个V-J重组区和1个D-J重组区,以分子量内标(Liz-500)为标准品,利用毛细管电泳技术使用一代测序仪进行基因片段扫描,最后通过GeneMapper ID-X数据分析软件,根据荧光信号差异识别PCR产物,并对数据进行自动分析。②从样本储存库中筛选40例HIV/AIDS患者在益艾康胶囊治疗前及治疗1年时的血液样本,采用上述方法检测TCRβ链CDR3重组区多样性,从峰形、目标区域曲线下面积、离散度等方面评估其变化情况。结果:①Liz-500可在分子量50~500 bp之间扫描出15条标记片段,用以判定目标片段长度。样本DNA完整,可检测出300 bp以上扩增峰。②健康对照组TCRβ链A/B/C管(其中A/B管为V-J区,C管为D-J区)峰形均呈现类似钟形的正态分布;③TCRβ链C管益艾康胶囊治疗前、后曲线下面积差异有统计学意义(P<0.05),即益艾康胶囊治疗后HIV/AIDS患者TCRβ链D-J区基因重组多样性较治疗前有所增加;④治疗前、后TCRβ链各管离散度均大于健康对照组(P<0.05)。结论:采用基因片段扫描检测T淋巴受体多样性,可以从不同角度分析益艾康胶囊对艾滋病的治疗效果,进而反映机体免疫系统状态。

关 键 词：艾滋病 益艾康胶囊 基因片段扫描 T淋巴受体 多样性 

分 类 号：R512.91[医药卫生—内科学]