地西泮scFv-Fc抗体的制备及其酶联免疫吸附检测方法的建立  

作　　者：徐泽华 孙铁强 韩振宇 刘肖 张樱樱 范龙兴 白家磊 宁保安 

机构地区：[1]军事科学院军事医学研究院环境医学与作业医学研究所,天津300050 [2]内蒙古医科大学公共卫生学院 [3]福州大学化学学院

出　　处：《解放军预防医学杂志》2020年第10期73-78,共6页Journal of Preventive Medicine of Chinese People's Liberation Army

基　　金：国家自然科学基金项目(No.2197060405)。

摘　　要：目的制备、鉴定高灵敏度、可溶性的地西泮(Diazepam,DZP)scFv-Fc抗体。方法通过传统的基因工程技术构建scFv-Fc重组质粒并转染FreeStyleTM 293F细胞进行表达和纯化;采用间接竞争ELISA的方法对抗体性质进行评价。结果制备了抗地西泮scFv-Fc抗体;与亲代地西泮单克隆抗体相比,其灵敏度提高了约2倍;与6种地西泮结构类似物基本上没有明显的交叉反应,表明该抗体具有良好的特异性;与经典的高效液相色谱法相比,与其测定的加标回收率和相对标准偏差具有良好的一致性。结论本研究中成功获得了高灵敏度和可溶性scFv-Fc抗体,为后续建立基于基因工程抗体的DZP快速免疫检测法提供了参考。

关 键 词：地西泮 纳米抗体 ELISA 融和表达 

分 类 号：R971[医药卫生—药品]