布莱凯特黑牛CRTC1、CRTC3基因克隆测序及表达分析  

作　　者：吴磊 刘瑞莉[1,2] 柏学进 刘贤勋[1,2] 吕娟娟 肖超柱 董雅娟 

机构地区：[1]青岛农业大学动物胚胎工程中心,山东青岛266109 [2]山东省黑牛繁育工程技术研究中心,山东青岛266109 [3]山东布莱凯特黑牛科技股份有限公司,山东淄博256306

出　　处：《中国畜牧杂志》2021年第3期119-125,共7页Chinese Journal of Animal Science

基　　金：山东省现代农业产业技术体系牛产业创新团队建设(668/2216030)。

摘　　要：为研究布莱凯特黑牛CRTC1、CRTC3基因序列和表达情况及其与生长发育的关系,本实验运用克隆测序方法检测CRTC1、CRTC3基因CDS区,并进行生物信息学分析;运用qRT-PCR技术检测不同组织和不同月龄的mRNA相对表达量;并用免疫组化技术对蛋白进行定位分析。结果显示:克隆测序获得的布莱凯特黑牛CRTC1、CRTC3基因CDS区分别为1773 bp和1725 bp,分别编码590、575个氨基酸;运用生物信息学分析后发现CRTC1、CRTC3结构稳定性差,为亲水性、偏酸性蛋白;进化树显示与牛、瘤牛、山羊和绵羊的同源性高(>80%),蛋白互作网络图显示CRTC1、CRTC3蛋白与FoxO基因家族、AMPK家族等基因相互作用强。qRT-PCR结果显示CRTC1、CRTC3基因分别在睾丸和脂肪中mRNA相对表达量最高(P<0.01),在肌肉组织中亦有表达。在肌肉组织中,CRTC1、CRTC3基因mRNA相对表达量随着年龄的增加逐渐降低;免疫组化显示CRTC1、CRTC3蛋白主要在肌肉组织的肌原纤维中表达。以上结果表明,CRTC1、CRTC3基因调控肌纤维生长发育,进而参与肌肉生长发育相关调节。

关 键 词：布莱凯特黑牛 CRTC1基因 CRTC3基因 实时荧光定量PCR 免疫组化 

分 类 号：S823.2[农业科学—畜牧学]