基于CRISPR编辑系统的DNA片段删除技术  

CRISPR-based DNA Fragment Deletion in Plants

作　　者：谢先荣 曾栋昌 谭健韬 祝钦泷[1] 刘耀光[1] Xianrong Xie;Dongchang Zeng;Jiantao Tan;Qinlong Zhu;Yaoguang Liu(State Key Laboratory for Conservation and Utilization of Subtropical Agro-Bioresources,College of Life Sciences,South China Agricultural University,Guangzhou 510642,China)

机构地区：[1]华南农业大学生命科学学院,亚热带农业生物资源保护与利用国家重点实验室,广州510642

出　　处：《植物学报》2021年第1期44-49,共6页Chinese Bulletin of Botany

基　　金：广东省基础与应用基础研究重大项目(No.2019B030302006)。

摘　　要：基于CRISPR/Cas9系统的基因组编辑技术已成为基因功能研究和遗传修饰的重要工具。在引导RNA的引导下,Cas9蛋白对基因组靶位点进行精准切割产生DNA双链断裂(DSB),借助细胞内的DSB修复机制,可实现基因组靶位点碱基的缺失、插入或者替换,甚至发生片段删除。该文介绍了基于CRISPR/Cas9基因组编辑系统的DSB微同源末端连接修复方式(MMEJ)提高基因组DNA片段删除效率的方法,主要从靶点设计和突变检测方面展开详细描述。CRISPR/Cas9-based genome editing technology has been an important tool to study the gene function and genomic modification.Directed by a guide RNA,Cas9 protein can cleavage the genomic DNA at the target site,and produce mutations,including deletion,insertion,substitution and fragment deletion,by DNA double strand break(DSB)repair mechanism.In this protocol,we introduce the method to use CRISPR/Cas9 system to increase the efficiency of genomic DNA fragment deletion with microhomology-mediated end joining,especially the details in target design and detection of mutant plants.

关 键 词：基因组编辑 CRISPR/Cas9 MMEJ 微同源 片段删除 

分 类 号：Q78[生物学—分子生物学]