猪圆环病毒3型实时荧光定量PCR检测方法的建立  

作　　者：骆辉 阴文奇[1,2] 高露茜 王雪涛 罗旭 廖果 李书伟 周远成[1,2] 

机构地区：[1]四川省畜牧科学研究院,畜禽生物制品四川省重点实验室,动物遗传育种四川省重点实验室,四川成都610066 [2]畜科生物工程有限公司,四川省动物生物制品工程技术研究中心,四川成都610200

出　　处：《四川畜牧兽医》2021年第5期30-32,35,共4页Sichuan Animal & Veterinary Sciences

基　　金：四川省科技计划项目(2018JY0378)。

摘　　要：为建立一种快速、特异、灵敏的猪圆环病毒3型(PCV3)实时荧光定量PCR检测方法,本研究根据GenBank中PCV3全基因组序列高度保守区域设计了一对特异性引物和探针,通过对反应体系和扩增条件进行优化,建立了能够特异性检测PCV3的荧光定量PCR方法。该方法对7.87×10^(3)~7.87×10^(9)拷贝/μL的PCV3标准质粒呈现良好的线性关系,最低检出浓度为7.87×10^(1)拷贝/μL,比常规PCR的灵敏度高100倍。与猪伪狂犬病毒、猪圆环病毒2型、猪细小病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪乙型脑炎病毒、猪传染性胃肠炎病毒和猪流行性腹泻病毒均无交叉反应,具有良好的特异性。不同浓度质粒标准品的组内和组间重复性试验结果均显示变异系数(CV)小于1%,重复性较好。对2018~2020年从四川省不同地区收集的329份正常猪血清及187份疑似PCV阳性临床样品进行检测,得出PCV3阳性率分别为31.3%和38.5%,流行率较高。上述结果表明,本研究建立的荧光定量PCR方法能够快速灵敏地检测PCV3,为PCV3的临床检测及流行病学调查奠定了基础。

关 键 词：猪圆环病毒3型 TaqMan荧光定量PCR方法 检测 

分 类 号：S854.43[农业科学—临床兽医学]