RT-PCR法微量加样操作优化  

作　　者：莫巧璇[1] 张劲丰[1] 苏荣[1] 黄声淳[1] 吴英[1] 

机构地区：[1]广东省佛山市中医院检验科,广东佛山528000

出　　处：《检验医学与临床》2021年第17期2479-2481,共3页Laboratory Medicine and Clinic

摘　　要：目的比较3种不同的内标加样方式对多重实时荧光反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测新型冠状病毒核酸的试验结果及内标异常率的影响,评价3种微量液体加样操作方式对试验结果监控的有效性,以便选择合适的微量液体加样操作方案。方法针对核酸提取环节中试剂和内标的加样,采取3种不同的方式把试验分成3组,每组各检测30批次标本,每批次检测的标本量为42~94份,分别计算3组内标正常和内标异常的标本数,对各组因内标异常而导致的复检进行统计学分析。结果在各组的30个批次检测结果中,A组共检测2644份标本,其中20个批次共62份标本出现内标异常,总复检率为2.24%,B组共检测2641份标本,其中21个批次共83份标本出现内标异常,总复检率为3.14%;C组共检测2723份标本,其中9个批次共11份标本出现内标异常,总复检率为0.40%。C组内标异常的标本数较A、B组明显减少,复检率较A、B组明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论基于内标多重实时荧光RT-PCR法进行核酸检测,对于微量的内标加样,使用合适的稀释液进行倍数稀释,放大加样量,可减少微量加样的操作误差,提高检测结果的有效性。

关 键 词：新型冠状病毒 多重实时荧光RT-PCR法 核酸检测 内标 微量加样 

分 类 号：R446.9[医药卫生—诊断学]