亚洲柑橘黄龙病的实时荧光PCR检测方法比较研究  

Comparative study on qPCR methods for detection of Asian citrus Huanglongbing

作　　者：张子悦 纪艺 冉强 魏巍[2] 王宇 李亮[3] 蔡健 陈笑芸[2] ZHANG Ziyue;JI Yi

机构地区：[1]阜阳师范大学生物与食品工程学院,安徽阜阳236037 [2]浙江省农业科学院农产品质量安全危害因子与风险防控国家重点实验室,杭州310021 [3]中国农业科学院生物技术研究所,北京100081

出　　处：《农产品质量与安全》2021年第6期31-37,共7页Quality and Safety of Agro-Products

基　　金：安徽省林业科技创新项目(AULYCX-2020-)“芍药属新品种培育”;安徽省教研项目(2020xnkyjsj3)“基于一二三产业融合发展的地方高校新农科多样化人才培养模式的创新与实践”;2019年省级大学生创新创业训练计划项目(S201910371026)“樱花色素成分鉴定及其优质种质资源开发利用”。

摘　　要：柑橘黄龙病号称柑橘的“癌症”,早发现、早诊断是防止该病蔓延的重要手段。近年来发展了一系列针对该病的实时荧光PCR(real-time quantitative PCR,qPCR)检测方法,但方法间的比较研究尚无报道。本研究以感染亚洲黄龙病的柑橘叶片为材料,对6组柑橘黄龙病qPCR检测所用引物探针进行比较,包括特异性和检出限及在数字PCR(digital PCR,dPCR)中的适用性。结果显示,这6组引物探针对黄龙病的检验特异性良好;灵敏度稍有差别,依次为Las>CLIB 11=CLIB 9>CLIB 12>CLIB 4>rpll;CLIB 9在dPCR反应中相对于其他引物雨滴现象严重,因此不宜选取做后续实验。Las、CLIB 11都适用于dPCR反应,相比之下CLIB 11热图略好一些。本研究为今后黄龙病鉴定方法的选择提供了参考。

关 键 词：柑橘 黄龙病 引物探针 实时荧光定量PCR 数字PCR 

分 类 号：S436.66[农业科学—农业昆虫与害虫防治]