地龙蛋白两种提取方法的活性比较  

作　　者：彭洪兵 袁仕君 尹聪 余军 黄必胜 李娟 

机构地区：[1]湖北中医药大学药学院,湖北武汉430065 [2]湖北伽玛生物科技有限公司,湖北武汉430065

出　　处：《时珍国医国药》2021年第8期1860-1862,共3页Lishizhen Medicine and Materia Medica Research

基　　金：中央本级重大增减支项目(2060302);重大新药创制国家科技重大专项(20142X0930K307001)。

摘　　要：目的比较两种不同提取方法对地龙可溶性蛋白提取率及活性的影响。方法分别采用BCA法测定蛋白含量,羟胺法测定T-SOD活性,APTT、PT试剂盒测定抗凝血活性,琼脂糖-纤维蛋白平板法测定纤溶酶活性,MTT法检测PIG1细胞的存活率。结果水提醇沉法和盐析法的提取率分别为(11.12±0.16)%、(4.96±0.19)%,纯度分别为(24.37±1.68)%、(42.49±1.9)%。水提醇沉法提取的地龙蛋白T-SOD和纤溶活性都明显高于盐析法,抗凝血活性略低于盐析法。两种蛋白均能显著提高PIG1细胞的存活率,并对H_(2)O_(2)诱导的PIG1细胞具有保护作用,但蛋白浓度不同时保护作用有所差异,0.1~0.2 mg·mL^(-1)的水提醇沉蛋白保护作用更强,0.4~0.8 mg·mL^(-1)的盐析蛋白的作用更显著。结论水提醇沉法提取的地龙蛋白的提取率、抗氧化和纤溶活性明显强于盐析法,其抗凝血活性和对皮肤细胞的保护作用与盐析法相似。

关 键 词：地龙蛋白 T-SOD 抗凝血 PIG1细胞 氧化损伤 

分 类 号：R284.2[医药卫生—中药学]