健脾清热活血方介导microRNA-222-3p调控TGF-β1、CDKN1B/p27表达防治结肠癌的离体研究  

作　　者：张涛[1] 张馨月 卢鑫 黄晓燕[3] 林逸婷 

机构地区：[1]广西中医药大学附属瑞康医院,广西南宁530000 [2]广西中医药大学,广西南宁530000 [3]广西中医药大学第一附属医院,广西南宁530000

出　　处：《时珍国医国药》2021年第8期1863-1867,共5页Lishizhen Medicine and Materia Medica Research

基　　金：广西自然科学基金(2018GXNSFAA281042);广西中医药大学一流学科项目(2018XK082,2019XK164);广西中医药大学广西研究生创新计划项目(xjyb097)。

摘　　要：目的通过检测健脾清热活血方基于microRNA-222-3p调控TGF-β通路对结肠癌HCT-116细胞迁移的变化以及TGF-β1、CDKN1B/p27的表达,探讨该方防治结肠癌的效用及可能机制。方法参照血清药理学方法,制备大鼠含药血清。应用RNAi技术构建稳定沉默miR-222结肠癌HCT-116细胞系。离体实验随机分为空白对照组(HCT-116)、阴性对照组(NC)、阳性对照组(miR-222-3p沉默)、治疗组(miR-222-3p沉默+低/中/高剂量中药)。Transwell法检测细胞迁移能力,应用现代分子生物学技术检测TGF-β1、CDKN1B/p27表达。结果成功构建TUD-hsa-miR-222-3p Inhibitor慢病毒载体并获得miR-222稳定沉默的结肠癌HCT-116细胞系,与正常组及NC组对比,miR-222沉默后HCT-116细胞迁移能力明显下降,有显著差异(P<0.05);在治疗组中HCT-116细胞迁移数目较sh-miR222-3p组减少更为显著(P<0.05)。对于TGF-β1/CDKN1B/p27mRNA表达,与阳性对照组比较,治疗组CDKN1B/p27mRNA表达下调,差异有统计学意义(P<0.05)。WB结果显示,与阳性对照组相比,治疗组TGF-β1/CDKN1B/p27蛋白表达均下调,有统计学意义(P<0.05)。结论健脾清热活血方可能通过抑制miRNA-222-3p减少TGF-β1、CDKN1B/p27表达,降低细胞迁移能力,诱导结肠癌细胞凋亡,达到防治结肠癌的效用。

关 键 词：健脾清热活血方 microRNA-222-3p RNA干扰 转化生长因子-Β1 结肠癌 

分 类 号：R285.5[医药卫生—中药学]