藁本内酯通过抑制DAPK1表达对肺炎链球菌感染的肺泡上皮细胞损伤的保护作用及其机制  

作　　者：罗剑锋 罗丹 文丹宁 

机构地区：[1]武汉市金银潭医院感染科,湖北武汉430000

出　　处：《中国老年学杂志》2021年第24期5667-5671,共5页Chinese Journal of Gerontology

基　　金：武汉市临床医学科研项目资金资助(WX15B21)。

摘　　要：目的探讨藁本内酯(LIG)调控死亡相关蛋白激酶(DAPK)1表达对肺炎链球菌感染的肺泡上皮细胞损伤的保护作用。方法将肺泡上皮细胞(A549)分为对照组,感染组,感染+LIG-低组、感染+LIG-中组、感染+LIG-高组、感染+si-NC组、感染+si-DAPK1组、感染+LIG+pcDNA组、感染+LIG+pcDNA-DAPK1组。酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞培养液中白细胞介素(IL)-10和IL-6水平;流式细胞术检测细胞凋亡;qRT-PCR检测DAPK1 mRNA的表达水平;Western印迹检测DAPK1蛋白、B细胞淋巴瘤(Bcl)-2、Bcl-2相关X蛋白(Bax)和酶切含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(caspase)3的表达水平。结果与对照组比较,感染组IL-6水平显著升高,IL-10水平显著降低(均P<0.05);与感染组比较,感染+LIG-低、中、高组IL-6水平均显著降低,IL-10水平均显著升高,且呈显著的浓度依赖性(均P<0.05)。与对照组比较,感染组凋亡率显著增加,Bcl-2蛋白表达水平显著降低,Bax和酶切caspase3蛋白的表达水平显著升高(均P<0.05);与感染组比较,感染+LIG-低、中、高组细胞凋亡率显著降低,Bcl-2蛋白水平显著升高,Bax和酶切caspase3蛋白水平显著降低,且呈显著的浓度依赖性(均P<0.05)。与对照组比较,感染组DAPK1 mRNA和DAPK1蛋白水平显著升高(均P<0.05);与感染组比较,感染+LIG-低、中、高组DAPK1 mRNA和DAPK1蛋白水平显著降低,且呈显著的剂量依赖性(均P<0.05)。后续选取LIG 40μmol/L浓度进行实验。与对照组比较,感染组DAPK1蛋白、IL-6、Bax蛋白、酶切caspase3蛋白水平显著升高,IL-10和Bcl-2蛋白水平显著降低,细胞凋亡率显著升高(均P<0.05);与感染+si-NC组比较,感染+si-DAPK1组DAPK1蛋白、IL-6、Bax蛋白、酶切caspase3蛋白水平显著降低,IL-10和Bcl-2蛋白水平显著升高,细胞凋亡率显著降低(均P<0.05)。与感染组比较,感染+LIG组DAPK1蛋白、IL-6、Bax蛋白、酶切caspase3蛋白水平显著降低,IL-10和Bcl-2蛋白水平显著升高,细胞凋亡

关 键 词：藁本内酯 肺泡上皮细胞 肺炎链球菌感染 死亡相关蛋白激酶(DAPK)1 细胞损伤 

分 类 号：R285[医药卫生—中药学] R563.1[医药卫生—中医学]