青藤碱联合TNF-α抑制剂对RA模型大鼠骨破坏及体外破骨细胞活化的的影响  

作　　者：贺龙刚[1] 高奥 林晓辉 周丽[1] 

机构地区：[1]福建中医药大学,福建福州350122

出　　处：《时珍国医国药》2021年第10期2349-2352,共4页Lishizhen Medicine and Materia Medica Research

基　　金：国家自然科学基金(81302873);福建省自然科学基金(2019J01340);福建中医药大学校管课题重点项目(X2020013-重点)。

摘　　要：目的评价青藤碱(SIN)联合TNF-α抑制剂(阿达木单抗)对Mt佐剂诱导SD大鼠RA模型和体外破骨细胞模型活化的影响,及对AP-1/NFATc1通路分子的调控作用。方法药物分为青藤碱组,阿达木组,联合组(青藤碱+阿达木)。建立SD大鼠Mt佐剂诱导RA模型评价各组对动物的足肿胀度及关节滑膜损伤的影响。建立体外诱导破骨细胞模型,评价各组对破骨细胞生成的影响。建立RAW264.7细胞AP-1-luc和NFAT-luc瞬时转染模型,通过荧光素酶Luciferase测定评价各组对RANKL诱导的核转录因子AP-1和NFAT表达影响,再通过荧光定量RT-PCR和WesternBolt检测各组对RANKL诱导的RAW264.7细胞AP-1/NFATc1通路中c-Fos、c-Jun、Fra-1、Fra-2和NFATc1基因及蛋白表达的影响。结果青藤碱组、阿达木组,联合组均能改善造模14天后大鼠足肿胀水平,且阿达木组和联合组优于青藤碱组;HE染色结果显示各用药组均能减轻模型动物关节滑膜炎症侵润,且阿达木组和联合组优于青藤碱组。体外破骨细胞模型中,与模型组比较,各给药组均能明显抑制破骨细胞数量(P<0.05),阿达木组和联合组均显著优于青藤碱组(P<0.05),阿达木组显著优于联合组(P<0.05)。Luciferase检测发现各给药组均能显著抑制(P<0.05)RANKL诱导的NFAT和AP-1报告基因激活,阿达木组和联合组的抑制作用均强于青藤碱组,且具有显著性差异(P<0.05),而阿达木组和联合组之间无显著差异(P>0.05)。通过荧光定量RT-PCR和Western Bolt检测发现各给药组均能显著抑制c-Fos、c-Jun、Fra-1、Fra-2和NFATc1基因及蛋白表达(P<0.05),阿达木组和联合组作用均强于青藤碱组,且具有显著性差异(P<0.05),而阿达木组和联合组之间无显著差异(P>0.05)。结论青藤碱和TNF-α抑制剂能有效缓解RA大鼠骨破坏及体外破骨细胞生成,同时能对破骨细胞核心通路上的AP-1和NFAT核转录因子及其相关分子的表达产生抑制性调控,且二药联合应用能减�

关 键 词：青藤碱 TNF-Α抑制剂 类风湿性关节炎 破骨细胞 AP-1 NFATc1 

分 类 号：R285.5[医药卫生—中药学]