应用双抗体夹心酶联免疫吸附法定量检测白喉类毒素抗原  

Quantitative determination of diphtheria toxoid antigen by double-antibody sandwich enzyme-linked immunosorbent assay

作　　者：祝传顺 姚雷 周振发 洪禹 薛莹 朱卫华 杜琳 ZHU Chuanshun;YAO Lei;ZHOU Zhenfa

机构地区：[1]北京智飞绿竹生物制药有限公司,北京100176 [2]北京市细菌性疫苗工程技术研究中心

出　　处：《预防医学》2021年第12期1286-1289,共4页CHINA PREVENTIVE MEDICINE JOURNAL

摘　　要：目的对定量检测白喉类毒素(DT)抗原的双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)进行方法学验证并初步应用。方法以白喉抗毒素(DA)为包被抗体,大鼠抗DT抗体为检测抗体,辣根过氧化物酶标记的羊抗大鼠IgG抗体为酶标抗体检测DT抗原的含量,对双抗体夹心ELISA进行方法学验证。结果DT抗原含量在0~0.125 Lf/mL范围内反应曲线线性关系良好(r=0.996),8次重复实验的r值为0.995~0.997。该方法与破伤风类毒素(TT)抗原、百日咳类毒素(PT)抗原、百日咳丝状血凝素(FHA)抗原和百日咳黏附素(PRN)抗原无明显交叉反应,特异性较好。精密度验证变异系数为1.445%~4.431%,准确度验证回收率为91.86%~105.47%,准确检测范围为0.001953125 Lf/mL~0.125 Lf/mL,定量限为0.001953125 Lf/mL。分别采用双抗体夹心ELISA和絮状单位测定法测定6批类毒素原液中DT抗原的含量,结果显示2种检测方法呈高度相关(r=0.974),检测结果差异无统计学意义(P>0.05)。结论双抗体夹心ELISA灵敏度高,特异性强,能准确测定DT抗原的含量,可用于白喉疫苗生产工艺过程各阶段的抗原含量测定。

关 键 词：白喉类毒素 酶联免疫吸附法 双抗体夹心 

分 类 号：R517.1[医药卫生—内科学]