二草清肝汤抑制LPS引起肝损伤的TLR4及其下游信号分子表达  

Ercao Qinggan Decoction Inhibits the Expression of TLR4 and Its Downstream Signal Molecules inLPS Induced Liver Injury

作　　者：万苗 欧阳钦 吴春明 刘三海 赵安静 WAN Miao;OU Yangqin;WU Chunming

机构地区：[1]浙江中医药大学附属温州中医院,浙江温州325000

出　　处：《浙江中医杂志》2022年第1期4-7,共4页Zhejiang Journal of Traditional Chinese Medicine

基　　金：浙江省自然科学基金项目TLR4介导的信号通路对肝细胞凋亡的影响及二草清肝汤的干预机制研究,编号:LGF21H270001;浙江省中西医结合学会科研基金项目二草清肝汤对内毒素性肝损害模型小鼠肝脏kupffer细胞Toll样受体4信号通路的影响,编号:2019LY013。

摘　　要：目的:研究二草清肝汤(EQD)对内毒素脂多糖(LPS)联合D-氨基半乳糖(D-GalN)致小鼠急性肝损伤模型的:Toll样受体4(TLR4)信号通路的作用。方法:将21只BALB/C小鼠随机分为四个组:空白对照组(n=3)、内毒素模型组(n=7),均给予氯化钠溶液灌胃(3ml/kg);二草清肝汤小剂量组(n=6)、大剂量组(n=5)分别予生药含量为3.3g/ml、6.6g/ml的EQD溶液灌胃(3ml/kg)。每日1次,连续12天。最后一天灌胃4h后,除空白对照组外,其余组所有小鼠均腹腔注射LPS和D-GalN混合液造模,腹腔注射24h后,处死所有小鼠,剖取其肝脏称重、HE染色显微观察病理;各组小鼠TLR4、NF-κB表达情况,应用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法从RNA水平检测、WB法从蛋白表达水平定量测定;TLR4蛋白表达应用免疫组化法。结果:内毒素性肝损伤小鼠肝重均较空白对照组低,加入二草清肝汤后小鼠肝重上升;病理结果显示空白组小鼠的肝小叶轮廓界限分明、清晰且完整,肝窦散布有序、较宽;肝上皮细胞排列规整、呈多边形;细胞质染色均匀、细胞核清晰、未见明显肿胀变性,库普弗细胞分布均匀,未见周部大量聚集。内毒素模型组中巨噬细胞聚集,肝小叶结构混乱、排列无序;肝细胞脂肪沉积、水肿明显较空白组严重;而二草清肝汤组病变则较前改善。免疫组化结果说明内毒素处理后的模型组中TLR4蛋白表达显著上升,加入大剂量二草清肝汤后TLR4稍有下降(P<0.05);PCR结果显示内毒素处理后的模型组中TLR4、NF-κB mRNA表达下降,加入二草清肝汤后明显上升(P<0.05)。结论:二草清肝汤能够抑制肝细胞内TLR4信号通路的激活及相关炎症分子活化,改善LPS导致的肝损伤,其机制可能是EQD影响TLR4通路关键分子的蛋白翻译过程。

关 键 词：二草清肝汤 LPS TLR4/NF-κB 急性肝损伤 小鼠 

分 类 号：R285.5[医药卫生—中药学]