非洲猪瘟基因缺失株和非缺失株荧光定量PCR检测方法的建立  

作　　者：雷宇平[1] 图门巴雅尔 张仲萍[1] 孙杰[1] 宁艳[1] 王锦 张昱 胡明明 王治维[1] 赵凯 王仲兵[1] 

机构地区：[1]山西省动物疫病预防控制中心,030027

出　　处：《中国畜禽种业》2022年第2期41-44,共4页The Chinese Livestock and Poultry Breeding

基　　金：山西省重点研发计划项目《山西省非洲猪瘟防控技术研究》(201903D221002)。

摘　　要：为建立一种快速检测鉴别非洲猪瘟病毒(ASFV)基因缺失株和非缺失株的荧光PCR鉴别方法,通过查询Genbank数据库中收录的相关基因组序列,应用相关软件设计针对ASFV不同毒株序列的引特异性物,用荧光PCR技术检测ASFV的不同病毒毒株,并对该方法进行敏感性、精密性和特异性试验。结果显示,该方法能在最低1.3×103copies/ml检出ASFV P27基因质粒、ASFV CD2v基因缺失质粒和ASFV MGF360-505R基因缺失质粒3种毒株的核酸片段;使用该技术重复检测10次,3种毒株的检测CV均<1%,提示有较好的稳定性。利用国家标准品非洲猪瘟病毒B646L基因质粒和无菌无核酶水分别做阳性和阴性对照,测得该技术灵敏度为100%(10/10)、特异度为100%(20/20)。本研究建立的PCR技术能快速准确鉴定ASFV的不同毒株,为防控疫情提供流行病学依据。

关 键 词：非洲猪瘟病毒 ASFV 荧光PCR 

分 类 号：S852.65[农业科学—基础兽医学]