星形胶质细胞U251稳转FOXO1基因细胞系构建及其蛋白互作生物素验证  

Construction of astrocyte U251 steady-transition FOXO1 gene cell line and its protein interaction biotin validation

作　　者：曾挺 郭媛媛 郭婕妤 刘超[2] 刘武 ZENG Ting;GUO Yuan-yuan;GUO Jie-yu;LIU Chao;LIU Wu(School of Pharmacy,Xianning Medical College,Hubei Key Laboratory of Diabetes and Angiopathy,Hubei University of Science and Technology,Xianning,Hubei 437100,China;Xianning Medical College,Hubei Key Laboratory of Diabetes and Angiopathy,Hubei University of Science and Technology,Xianning,Hubei 437100,China)

机构地区：[1]湖北科技学院医学部药学院,湖北咸宁437100 [2]湖北科技学院医学部糖尿病与心脑血管病变湖北省重点实验室,湖北咸宁437100

出　　处：《中国药理学通报》2022年第5期799-800,共2页Chinese Pharmacological Bulletin

基　　金：国家自然科学基金资助项目(No 81870173);博士启动基金项目(No BK202011)。

摘　　要：蛋白-蛋白相互作用(protein-protein interactions,PPIs)是细胞生命活动的基础,以BioID和APEX为代表的蛋白质邻近标记技术逐渐被应用于蛋白质相互作用研究[1,2]。由于蛋白的相互作用大多是依靠氢键、盐键和疏水相互作用力进行,它们的空间距离都非常的短,所以通常认为互作的蛋白必定相互邻近[3]。TurboID是一种比BioID或APEX具有更高催化效率的蛋白质(标记时间从18 h缩短至10 min),由于很多蛋白发挥的结合与催化作用是很短暂的,理论上利用这个技术可以找到一些比较新颖的结合蛋白[4]。大量研究表明,FOXO1调控许多靶点,如参与细胞凋亡和自噬的基因、抗氧化酶、细胞周期阻滞基因以及代谢和免疫调节因子[5-6],被认为是一种具有复杂活性的超级转录因子。因此,我们将利用TurboID的高效性来寻找FOXO1的互作蛋白。

关 键 词：FOXO1 TurboID 稳转细胞系 蛋白互作 生物素 银染色法 

分 类 号：R329.24[医药卫生—人体解剖和组织胚胎学] R341[医药卫生—基础医学]