桑枝乙醇提取物通过NF-κB和MAPKs信号通路对LPS诱导RAW264.7细胞的抗炎作用  

作　　者：朱君 付立霞 支青[2] 刘雄利[2,3] 陈琳 田民义 王慧娟[2,3] 

机构地区：[1]贵州大学生命科学学院/农业生物工程研究院,山地植物资源保护与保护种质创新教育部重点实验室,山地生态与农业生物工程协同创新中心,贵州贵阳550025 [2]贵州大学西南药食两用资源开发利用技术国家地方联合工程研究中心,贵州贵阳550025 [3]贵州大学酿酒与食品工程学院,贵州贵阳550025

出　　处：《中成药》2022年第11期3648-3653,共6页Chinese Traditional Patent Medicine

基　　金：贵州省科学技术基金项目(黔科合基础-ZK[2021]一般520);贵州大学引进人才科研项目(贵大人基合字[2019]29号);贵州大学培育项目(贵大培育[2020]52号)。

摘　　要：目的研究桑枝乙醇提取物对LPS诱导RAW264.7细胞炎症模型的影响,并探究其分子作用机制。方法通过回流提取法制备桑枝乙醇提取物,并采用可见分光光度法检测样品中总黄酮的含量。采用MTT法检测桑枝乙醇提取物对RAW264.7细胞的毒性作用,采用Griess法检测细胞上清液一氧化氮(NO)水平,ELISA法检测细胞上清液白细胞介素6(IL-6)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平,DCFH-DA荧光探针法检测细胞中活性氧(ROS)水平,倒置荧光显微镜观察细胞形态变化,RT-qPCR法检测细胞iNOS、COX-2、TNF-α、IL-6、IL-1β、Arg-1、IL-10 mRNA表达及细胞M1/M2表型的作用,Western blot法检测细胞iNOS、COX-2、NF-κB、MAPKs信号通路蛋白表达。结果桑枝乙醇提取物中总黄酮含量为(8.47±0.12)%。桑枝乙醇提取物能抑制LPS诱导的RAW264.7细胞炎症因子水平(P<0.05,P<0.01),能调控RAW264.7细胞由M1向M2表型的转化,能下调促炎因子mRNA的转录表达和上调抑炎因子mRNA的转录表达(P<0.05,P<0.01),能下调NF-κB信号通路细胞核P65蛋白表达、IKBα磷酸化及MAPKs信号通路p38、JNK和ERK蛋白磷酸化(P<0.05,P<0.01)。结论桑枝乙醇提取物对LPS诱导RAW264.7细胞炎症模型具有较好的抗炎效果,其内在的分子机制可能与下调NF-κB和MAPKs信号通路有关。

关 键 词：桑枝乙醇提取物 抗炎 RAW264.7细胞 M1/M2表型 NF-ΚB信号通路 MAPKS信号通路 

分 类 号：R285.5[医药卫生—中药学]