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作 者:杨和银[1] 魏海燕[1] 田云涛 阿依帕夏·艾沙 姜伶[1] 吐尔逊娜依·艾海提
出 处:《中国老年学杂志》2022年第23期5810-5814,共5页Chinese Journal of Gerontology
基 金:新疆维吾尔自治区自然科学基金项目(2019D01C005)。
摘 要:目的探究LncRNA XLOC_036125-Lgmn-Beclin-1轴在造影剂所致急性肾损伤中的影响及机制。方法构建大鼠肾小管细胞CI-AKI模型。转染LncRNA XLOC_036125稳定过表达载体/LncRNA XLOC siRNA干扰细胞水平LncRNA XLOC表达量,采用RT-qPCR和Western印迹实验观察LncRNA XLOC_036125对Lgmn基因及蛋白表达水平的影响;采用双荧光素酶报告基因实验检测LncRNA XLOC_036125和Lgmn靶向作用关系。采用GST-pull down实验检测Lgmn蛋白与Beclin-1蛋白之间相互作用关系;构建Lgmn稳定过表达重组质粒载体及Lgmn siRNA,采用RT-qPCR和Western印迹实验观察Lgmn对Beclin-1基因及蛋白表达水平的影响。同时采用RT-qPCR和Western印迹实验观察LncRNA XLOC_036125对Beclin-1基因及蛋白表达水平的影响,探究LncRNA XLOC_036125调控Lgmn与Beclin-1参与自噬过程的作用。结果与空载质粒对照组比较,LncRNA XLOC_036125重组质粒组HK-2细胞中,Lgmn mRNA及蛋白表达明显增高(P<0.05);与siRNA对照组比较,LncRNA XLOC_036125 siRNA组HK-2细胞中,Lgmn mRNA及蛋白表达则明显降低(P<0.05);LncRNA XLOC_036125和Lgmn存在靶向结合关系;在HK-2细胞中,Lgmn蛋白与Beclin-1蛋白存在靶向结合关系,转染Lgmn稳定过表达重组质粒后,HK-2细胞中Beclin-1 mRNA及蛋白表达明显增高(P<0.05),转染Lgmn siRNA后,HK-2细胞中Beclin-1 mRNA及蛋白表达明显降低(P<0.05);与空载质粒对照组比较,LncRNA XLOC_036125重组质粒组HK-2细胞中Beclin-1 mRNA及蛋白表达明显增高(P<0.05),LncRNA XLOC_036125 siRNA组HK-2细胞中Lgmn mRNA及蛋白表达则明显低于siRNA对照组(P<0.05)。结论LncRNA XLOC_036125可通过靶向结合Lgmn调控Lgmn及下游Beclin-1表达水平,参与HK-2细胞自噬调控作用,影响CI-AKI的发生。
关 键 词:急性肾损伤 急性心肌梗死 长链非编码RNA 细胞自噬
分 类 号:R541.4[医药卫生—心血管疾病]
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