GPR160信号通路对高糖环境下雪旺氏细胞的保护作用研究  

作　　者：王晨菲[1] 张春雪[2] 高静[1] 

机构地区：[1]新疆医科大学第五附属医院内分泌科,新疆乌鲁木齐830000 [2]新疆医科大学第五附属医院体检科,新疆乌鲁木齐830000

出　　处：《东南大学学报（医学版）》2022年第5期702-707,共6页Journal of Southeast University(Medical Science Edition)

基　　金：新疆维吾尔自治区自然科学基金资助项目(2021D01C436)。

摘　　要：目的:探讨G蛋白偶联受体160(GPR160)信号通路对高糖环境下雪旺氏细胞(SCs)损伤的保护作用。方法:培养SCs细胞系RSC96,Control组使用DMEM培养基,150 mmol·L^(-1)葡萄糖(GLU)组将DMEM培养基中的GLU浓度换为150 mmol·L^(-1)。小干扰RNA-GPR160敲降质粒组(siGPR160)和阴性对照组(siNC)分别转染150 mmol·L^(-1) GLU组的RSC96细胞。四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞活力;流式细胞术分析细胞中Ca^(2+)水平和凋亡率变化;透射电子显微镜观察内质网(ER)超微结构;蛋白质印迹法和(或)实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测细胞中GPR160/可卡因和安非他明调节的转录肽(CARTp)信号通路的表达、C/EBP-同源蛋白(CHOP)相关的生长阻滞以及DNA损伤诱导蛋白34(GADD34)、ER氧化还原酶1α(Ero1α)、CHOP上游的蛋白需肌醇酶1(IRE1α)和X-框结合蛋白1(XBP-1)的表达。结果:与Control组比较,150 mmol·L^(-1)的GLU抑制RSC96细胞活力,诱导细胞凋亡率和Ca^(2+)水平增加(均P<0.05),促进细胞中ER出现碎片形态,150 mmol·L^(-1)的GLU还增加GPR160、CARTp、GADD34、Ero1α、IRE1α、XBP-1的表达量(均P<0.05);用siGPR160敲降GPR160后,不仅下调CARTp、GADD34、Ero1α、IRE1α、XBP-1的表达量(均P<0.05),还上调RSC96细胞活力(P<0.05),降低了细胞凋亡率和Ca^(2+)水平(均P<0.05),并使细胞中ER形态趋于完整。结论:敲降GPR160蛋白能通过抑制GPR160信号通路改善高糖环境下SCs凋亡和ER应激损伤。

关 键 词：GPR160信号通路 高糖 雪旺氏细胞 细胞凋亡 内质网应激 

分 类 号：R3[医药卫生—基础医学] R587.2