春尺蠖可溶性海藻糖酶AcinTre1A和AcinTre1A-like基因的克隆及饥饿胁迫下表达谱  

Cloning and expression profile of soluble trehalase AcinTre1A and AcinTre1A-like genes from Apocheima cinerarius under

作　　者：陈龙 董飞龙 王建 查干[4] 崔阔澍 马杰茹 Chen Long

机构地区：[1]河套学院农学系,内蒙古巴彦淖尔015000 [2]内蒙古磴口县林业和草原有害生物防治检疫站,内蒙古巴彦高勒015299 [3]内蒙古乌拉特前旗草原工作站,内蒙古乌拉特前旗014407 [4]内蒙古巴彦淖尔市草原工作站,内蒙古巴彦淖尔015000 [5]四川省农业技术推广总站,四川成都610041

出　　处：《江苏农业科学》2023年第2期58-66,共9页Jiangsu Agricultural Sciences

基　　金：内蒙古自然科学基金(编号:2021BS03028);河套学院人才引进项目(编号:HYRC2019004)。

摘　　要：海藻糖酶(trehalase,Tre)是昆虫体内海藻糖代谢的关键酶,在生长发育与能量调节中扮演重要角色。为克隆春尺蠖(Apocheima cinerarius)海藻糖酶基因,分析其序列特征及系统进化关系,同时对其在不同饥饿处理时间下的表达水平进行分析,明确海藻糖酶基因在春尺蠖应对饥饿胁迫中的作用,基于春尺蠖4龄幼虫转录组数据,结合RT-PCR技术克隆春尺蠖Tre和Tre-like基因,分析其氨基酸的理化性质,同时分析序列一致性及系统进化关系。克隆获取春尺蠖2条可溶性Tre和Tre-like基因,分别命名为AcinTre1A和AcinTre1A-like,预测分子式分别为C_(3122)H_(4716)N_(806)O_(934)S_(16)和C_(3037)H_(4620)N_(800)O_(856)S_(14),CDS全长分别为1803、1746 bp,分别编码601、582个氨基酸,蛋白的预测分子量分别为68.99、66.48 ku,理论预测等电点分别为4.95、6.08;AcinTre1A为不稳定亲水蛋白,而AcinTre1-like为稳定亲水蛋白;编码蛋白均具有海藻糖酶超家族保守结构域、信号肽,但无跨膜结构;磷酸位点检测在AcinTre1A与AcinTre1A-like中分别发现丝氨酸26、22个,苏氨酸16、11个,酪氨酸13、15个;均发现1个糖基化位点。序列一致性分析表明,春尺蠖AcinTre1A与灰斑霜尺蠖Apocheima pilosaria的一致性最高,为88.54%,AcinTre1A-like与烟草天蛾Manduca sexta的一致性为79.21%;系统进化结果表明,AcinTre1A和AcinTre1A-like分别聚在2个分支上;春尺蠖AcinTre1A与同为尺蛾科的灰斑霜尺蠖ApilTre1A聚为一类,AcinTre1A-like与天蛾科的烟草天蛾聚为一类;斜纹夜蛾Spodoptera litura与草地贪夜蛾Spodoptera frugiperda Tre-like基因在系统进化树中与其他昆虫的Tre更近。基因表达结果表明,随着饥饿处理时间的增加,AcinTre1A和AcinTre1A-like的表达量均呈现下降趋势,AcinTre1A-like下降速度较缓,AcinTre1A则下降较快;与对照相比,除6 h外,其余时间基因表达量均差异显著(P<0.05)。海藻糖酶基因在春尺蠖应对饥饿胁迫的响应中�

关 键 词：春尺蠖 海藻糖酶基因 饥饿胁迫 表达分析 

分 类 号：S186[农业科学—农业基础科学]