金佛山方竹ISSR-PCR反应体系的建立与优化  

Establishment and Optimization of ISSR-PCR Reaction System of Chimonobambusa utilis

作　　者：刘伊苒 鞠壮 邓珺杭 师云凡 丁显平[1,2] LIU Yiran;JU Zhuang;DENG Junhang

机构地区：[1]四川大学生命科学学院,成都610000 [2]特色生物资源研究与利用川渝共建重点实验室,重庆400000

出　　处：《林业科技通讯》2022年第11期22-26,共5页Forest Science and Technology

基　　金：重庆市科技局项目:中国方竹种质资源库建设及良种选育应用(cstc2019jscx-gksbX0141)。

摘　　要：以金佛山方竹(Chimonobambusa utilis)的幼嫩叶片为实验材料,采用单因素分析的方法对金佛山方竹的ISSR-PCR反应体系及反应程序进行优化,成功筛选出12条有效引物,并逐一确定了其退火温度。以引物UBC825(ACA CAC ACA CAC ACA CT)为例对体系中的Taq 2×PCR Master Mix用量、引物浓度、模版DNA用量、退火温度、循环次数进行研究。结果表明,25μL的反应体系,其中含16.5μL Taq 2×PCR Master Mix、0.6μmol/L引物、80 ng模版DNA。相应的反应程序为95℃预变性3 min;95℃变性30 s,55℃退火30 s,72℃延伸90 s,30个循环;72℃延伸5 min,4℃保存。该反应体系的建立与优化可为后期分析金佛山方竹遗传多样性及亲缘关系提供一定的理论基础。

关 键 词：金佛山方竹 Chimonobambusa utilis ISSR 体系优化 引物筛选 

分 类 号：S795[农业科学—林木遗传育种]