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机构地区:[1]武汉市第三医院重症医学科,湖北武汉430071
出 处:《中国老年学杂志》2023年第4期959-964,共6页Chinese Journal of Gerontology
摘 要:目的 研究miR-212-5p对香烟烟雾提取物(CSE)诱导的人胚肺成纤维细胞(MRC-5)炎症因子释放和凋亡的影响和机制。方法 MRC-5分成对照(Control)组、CSE(CSE诱导)组、CSE+miR-NC(转染mimics control, CSE诱导)、CSE+miR-212-5p(转染miR-212-5p mimics, CSE诱导)组,实时荧光定量PCR(qPCR)方法检测miR-212-5p表达,用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测炎症因子白细胞介素(IL)-1β、IL-8、肿瘤坏死因子(TNF)-α水平,用CCK-8法检测细胞增殖活性,用流式细胞术检测细胞凋亡变化,用Western印迹方法检测细胞中C-半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶(Caspase)-3、核因子(NF)-κB p65蛋白表达。用NF-κB信号激活剂和miR-212-5p mimics联合处理经CSE诱导的MRC-5,同样测定细胞中炎症因子分泌、细胞增殖、凋亡和C-Caspase-3、NF-κB p65蛋白表达。结果 与Control组比较,CSE组MRC-5中miR-212-5p表达水平明显降低,细胞分泌的IL-1β、IL-8、TNF-α明显增多,细胞增殖活性明显降低,细胞凋亡水平明显升高,细胞中C-Caspase-3、NF-κB p65蛋白表达明显增多(P<0.05)。与CSE+miR-NC组比较,CSE+miR-212-5p组MRC-5中miR-212-5p表达水平明显升高,细胞分泌的IL-1β、IL-8、TNF-α明显减少,细胞增殖活性明显升高,细胞凋亡水平明显降低,细胞中C-Caspase-3、NF-κB p65蛋白表达明显减少(P<0.05)。NF-κB信号激活剂可以逆转miR-212-5p对CSE诱导的MRC-5炎症因子释放、增殖和凋亡作用。结论 miR-212-5p下调NF-κB信号抑制CSE诱导的MRC-5炎症因子释放和凋亡。
关 键 词:miR-212-5p 炎症 凋亡 胚肺成纤维细胞
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