不同染色与冷冻方法对关中奶山羊X、Y精子的分离及应用效果研究  

作　　者：王广 邹家浩 李德娴 张永涛 余梦琦 王建刚[1] 田全召 李广[1] 

机构地区：[1]西北农林科技大学动物科技学院,陕西杨凌712100 [2]河南省鼎元种牛育种有限公司,河南郑州450000

出　　处：《中国畜牧杂志》2023年第3期180-184,共5页Chinese Journal of Animal Science

基　　金：陕西省农业协同创新与推广联盟重大科技项目(LM ZD202002);陕西省科技协同创新项目(2018ZDCXL-NY-01-04);陕西省农业科学科技创新与推广项目(NYKJ-2019-YL16)。

摘　　要：为探究不同Hoechst 33342的染色浓度与冷冻方法对关中奶山羊X、Y精子进行分离及应用效果的影响,本实验采集6只关中奶山羊精液,使用浓度分别为10、11、12、13μL/m L的Hoechst 33342(5 mg/m L)染色液对精液样本进行染色,以流式细胞仪分离X精子和Y精子,应用3种不同冷冻程序冷冻精液,应用体外受精与胚胎发育技术评估关中奶山羊X、Y精液的分离准确性。结果表明:12μL/m L Hoechst 33342染色条件下,奶山羊X、Y精子分离效率达到91.02%,高于10μL/m L和13μL/m L(P<0.01),最高分选速度为4 134个/s(P<0.05);公羊个体的精液品质越好,其精子的分离速度越快,但对分离准确率的差异不显著;使用冷冻程序2进行关中奶山羊的X、Y精子冷冻的效果较好(P<0.05);体外受精48 h后,使用Y精子进行受精的卵细胞的卵裂率高于使用X精子(P<0.05),在胚胎培养第9天,使用Y精子进行受精的卵细胞的囊胚发育率高于使用X精子(P<0.05)。总之,当Hoechst 33342浓度为12μL/m L,冷冻程序为起始温度5℃;5℃~-10℃,降温时间180 s(降温速率6℃/min);-10℃~-140℃,降温时间156 s(降温速率50℃/min)时,关中奶山羊X、Y精子进行分离及应用效果最好。

关 键 词：精子染色 X、Y精子分离 流式细胞仪 冷冻程序 关中奶山羊 

分 类 号：S827.3[农业科学—畜牧学]