基于网络药理学和细胞实验探讨六味顺激方治疗肠易激综合征的作用  

作　　者：李敏瑶 张耀敏 李泽豪[1,2] 周福生 郑学宝[1,2] 苏子仁 黄海阳[4] 金真[3] 许仕杰[3] 黄晓其[1,2] 

机构地区：[1]广州中医药大学中药学院,广东广州510006 [2]东莞广州中医药大学研究院,广东东莞523808 [3]广州中医药大学,广东广州510400 [4]广州中医药大学东莞医院,广东东莞523127

出　　处：《中成药》2023年第3期987-998,共12页Chinese Traditional Patent Medicine

基　　金：广东省自然科学基金面上项目(2019A1515010819);广东省普通高校青年创新人才类项目(2018KQNCX045);广州中医药大学“双一流”与高水平大学学科协同创新团队培育项目(2021XK34)。

摘　　要：目的基于网络药理学和细胞实验探讨六味顺激方治疗肠易激综合征的关键靶点基因和信号通路。方法通过TCMSP数据库检索六味顺激方中药物活性成分和靶点基因,与DisGeNET、Pharm和CTD数据库中获取的肠易激综合征疾病靶点相映射,并基于GEO数据库筛选肠易激综合征与健康人差异基因,采用R语言和Cytoscape软件对关键靶点基因进行蛋白质相互作用网络(PPI)、基因本体(GO)功能注释和京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析。基于脂多糖诱导的NCM460细胞模型,通过流式细胞术、免疫荧光、ELISA、Western blot、RT-qPCR法对关键靶点基因进行验证。结果检索得到六味顺激方活性成分85个,药物靶点274个,肠易激综合征相关靶点416个,药物和疾病交集靶点82个,其中人血管内皮生长因子A(VEGF-A)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子(TNF)、蛋白激酶(Akt1)、丝裂原活化蛋白激酶1(MAPK1)、原癌基因(JUN)、白细胞介素-1β(IL-1β)、细胞趋化因子8(CXCL8)、丝裂原活化蛋白激酶8(MAPK8)、细胞趋化因子2(CCL2)和细胞间黏附分子-1(ICAM-1)是六味顺激方治疗肠易激综合征的关键靶点,细胞对脂多糖的应答和TNF信号通路可能是六味顺激方治疗肠易激综合征的效应机制。细胞实验结果显示,六味顺激方在降低VEGFR表达的同时抑制MAPK信号通路的主要下游靶点蛋白(ERK、JNK和JUN),进而减少炎症因子、趋化因子、血管生成因子和黏附因子的释放,缓解细胞凋亡同时抑制炎症反应恶性循环,从而缓解肠易激综合征。结论六味顺激方能通过多靶点、多通路发挥治疗肠易激综合征的效应,其机制可能是通过靶向抑制VEGFR并抑制MAPK信号通路下游关键蛋白改善血管生成、炎症反应。

关 键 词：六味顺激方 肠易激综合征 血管生成 VEGFR/MAPK信号通路 

分 类 号：R966[医药卫生—药理学]