猪大肠埃希菌和沙门氏菌双重PCR检测方法的建立  

Development of a duplex PCR for detection of swine Escherichia coli and Salmonella

作　　者：徐翔飞 黄盼 崔雪梅 黄叶娥 季权安[1] 韦强[1] 肖琛闻[1] 鲍国连[1,2] 刘燕 XU Xiangfei;HUANG Pan;CUI Xuemei

机构地区：[1]浙江省农业科学院畜牧兽医研究所,浙江杭州310021 [2]浙江农林大学动物科技学院·动物医学院,浙江杭州311300

出　　处：《浙江农业科学》2023年第4期957-963,共7页Journal of Zhejiang Agricultural Sciences

基　　金：浙江省重点研发计划项目(2021C02007)。

摘　　要：旨在建立一种针对猪大肠埃希菌和沙门氏菌的特异、高效的双重PCR检测方法并应用于临床样品检测。本研究针对大肠埃希菌保守序列16SrRNA基因和沙门氏菌的特异性基因侵袭蛋白A基因(invA),采用Primer 3.0 Plus分别设计合成两对特异性引物,在此基础上建立并优化双重PCR反应体系。结果显示,该双重PCR检测方法能有效扩增出猪大肠埃希菌和沙门氏菌的144 bp和610 bp的特异性片段,PCR产物测序结果为目标片段;对副猪嗜血杆菌、产气荚膜梭菌、巴氏杆菌、波氏杆菌、链球菌的扩增结果均为阴性。将该方法应用于临床样品检测,对55例病猪的血液和组织样品进行分离检测,检测出大肠埃希菌12例,沙门氏菌4例,混合感染1例,与已报道的PCR检测方法符合率为98.20%。表明该研究建立的双重PCR体系可为临床猪大肠埃希菌、沙门氏菌及混合感染提供一种灵敏且高效的检测方法。

关 键 词：猪大肠埃希菌 猪沙门氏菌 双重PCR 

分 类 号：S828.9[农业科学—畜牧学]