非洲猪瘟病毒荧光定量PCR检测方法的建立  

Development of the fluorescence quantitative PCR assay for detection of African swine fever virus

作　　者：余斌[1] 徐丽华[1] 李军星[1] 苏菲[1] 叶十一 袁秀芳[1] YU Bin;XU Lihua;LI Junxing

机构地区：[1]浙江省农业科学院畜牧兽医研究所,浙江杭州310021

出　　处：《浙江农业科学》2023年第4期964-967,共4页Journal of Zhejiang Agricultural Sciences

基　　金：浙江省重点研发计划(2020C02012)。

摘　　要：为建立一种快捷高效的非洲猪瘟病毒(ASFV)的检测方法,本研究根据GenBank中登录的ASFV B646L基因保守区序列设计引物和探针,通过优化PCR反应体系和反应条件,建立了非洲猪瘟Taqman荧光定量(ASFV-qPCR)检测方法,验证其特异性、灵敏性和重复性。结果显示:本研究所建立的检测方法特异性强,与猪瘟病毒(CSFV)、猪伪狂犬病病毒(PRV)、猪圆环病毒(PCV)、猪细小病毒(PPV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)均无交叉反应;灵敏度高,能检出10拷贝阳性质粒DNA;重复性好,组内和组间重复试验变异系数均小于1.5%。本研究为非洲猪瘟快速诊断提供了有力技术支撑,为进一步开发ASFV多重荧光PCR检测技术奠定了坚实的基础。

关 键 词：非洲猪瘟病毒 荧光定量PCR B646L 检测 

分 类 号：S828.9[农业科学—畜牧学]