慢乙肝治疗性疫苗IFN-γ-preS1表位分析及卡介苗重组穿梭质粒pMV261构建  

作　　者：何月月 于明凯 朱玥洁[2] 麦尔哈巴·艾斯卡尔 周玥 张峰波[3] 鲁晓擘[4] 丁剑冰[1] HE Yueyue;YU Mingkai;ZHU Yuejie;Maierhaba Aisikaer;ZHOU Yue;ZHANG Fengbo;LU Xiaobo;DING Jianbing(School of Basic Medicine of Xinjiang Medical University,Urumqi 830017,China;Reproductive Assistance Center,the First Affiliated Hospital of Xinjiang Medical University,Urumqi 830054,China;Laboratory Department,the First Affiliated Hospital of Xinjiang Medical University,Urumqi 830054,China;Infection Department,the First Affiliated Hospital of Xinjiang Medical University,Urumqi 830054,China)

机构地区：[1]新疆医科大学基础医学院,乌鲁木齐830017 [2]新疆医科大学第一附属医院生殖助孕中心,乌鲁木齐830054 [3]新疆医科大学第一附属医院检验科,乌鲁木齐830054 [4]新疆医科大学第一附属医院感染科,乌鲁木齐830054

出　　处：《新疆医科大学学报》2023年第2期145-152,共8页Journal of Xinjiang Medical University

基　　金：国家自然科学基金(81960373,82060115)。

摘　　要：目的运用生物信息学方法分析预测乙型肝炎病毒(Hepatitis B virus,HBV)的前S1(preS1)蛋白和重组IFN-γ-preS1蛋白的T、B细胞优势表位,构建卡介苗(Bacille calmette-guérin,BCG)重组pMV261穿梭质粒。方法NCBI数据库中获取γ干扰素(Interferonγ,IFN-γ)和preS1的氨基酸序列,应用I-TASSER构建三级结构并对重组蛋白进行免疫模拟。利用SnapGene软件将重组IFN-γ-preS1蛋白全长基因插入大肠埃希菌-BCG穿梭质粒pMV261中,构建BCG重组pMV261。结果preS1蛋白与重组IFN-γ-preS1蛋白分别由118和299个氨基酸组成。IFN-γ蛋白与特异性抗原preS1蛋白进行融合后,preS1蛋白的亲水性、稳定性均未发生改变,其二级结构和三级结构亦能正常表达。preS1蛋白经重组后,其B细胞抗原表位由preS1蛋白的4~18位、25~40位和41~59位氨基酸分别变为重组IFN-γ-preS1蛋白的185~199位、207~221和222~242位氨基酸,其余未发生改变;其Th细胞抗原表位、细胞毒性T(CTL)细胞抗原表位与重组IFN-γ-preS1蛋白的Th细胞抗原表位、CTL细胞抗原表位相比,仅位置改变,其余未发生改变。琼脂糖凝胶电泳模拟结果显示,重组IFN-γ-preS1蛋白大小为897 bp,空载质粒大小为4488 bp,构建的BCG重组pMV261穿梭质粒大小为5359 bp。免疫模拟结果表明,该重组疫苗可激活细胞免疫和体液免疫。结论BCG重组pMV261穿梭质粒的构建,为进一步研究慢性乙型肝炎(Chronic hepatitis B,CHB)的BCG治疗性疫苗奠定了理论基础。

关 键 词：HBV CHB BCG PRES1 抗原表位 基因重组 

分 类 号：R373.21[医药卫生—病原生物学]