牛病毒性腹泻病毒、牛轮状病毒与牛冠状病毒三重RT-PCR方法的建立与应用  

作　　者：余波 姜玲玲 李婷 周景瑞 许浩翔 冉江[1] 罗文菊 刘镜 

机构地区：[1]贵州省农业科学院畜牧兽医研究所,贵州贵阳550000

出　　处：《中国畜禽种业》2023年第4期96-100,共5页The Chinese Livestock and Poultry Breeding

基　　金：贵州省农业科学院基础性公益性专项“贵州省农业基础性长期性科技工作-动物疫病数据观测监测”(黔农科院基础性公益性专项[2022] 08号);贵州省农业农村厅“贵州省现代肉牛产业技术体系建设项目”(GZCYTX2022-0302)。

摘　　要：为建立快速同步检测牛病毒性腹泻病毒、牛轮状病毒与牛冠状病毒的多重RT-PCR检测方法并应用于临床检测。根据GenBank中三种病毒参考毒株的基因序列,设计3对特异性引物。利用构建的三种病毒的标准质粒进行三种病毒的三重RT-PCR方法,进行特异性、敏感性和重复性检验,并进行临床样品检测。特异性结果显示,建立的牛病毒性腹泻病毒、牛轮状病毒和牛冠状病毒的三重RT-PCR方法可特异性扩增出阳性标准质粒的基因片段,对牛源沙门氏菌、大肠杆菌、牛巴氏杆菌、牛支原体无扩增;敏感性结果显示,对牛病毒性腹泻病毒、牛轮状病毒和牛冠状病毒质粒核酸最低检测浓度分别为250、 250和25ng/mL。重复性结果显示,能扩增出一致的目的基因条带。临床样品结果显示,三重RT-PCR方法和单一RT-PCR符合率100%。可见,建立牛病毒性腹泻病毒、牛轮状病毒和牛冠状病毒的三重RT-PCR方法特异性强、敏感性高、重复性好,可进行临床检测。

关 键 词：牛 病毒性腹泻/黏膜病病毒 轮状病毒 冠状病毒 三重RT-PCR 

分 类 号：S858.23[农业科学—临床兽医学]