山羊痘病毒和绵羊痘病毒荧光PCR检测方法的建立与应用  

作　　者：啜微微 耿庆华 赵永刚[2] 孟祥勇 张敏[3] 韩小虎[3] 赵治国 付海滨 

机构地区：[1]沈阳海关技术中心,辽宁沈阳100016 [2]中国动物卫生与流行病学中心,山东青岛266033 [3]沈阳农业大学,辽宁沈阳110866 [4]呼和浩特海关技术中心,内蒙古呼和浩特010020

出　　处：《农业与技术》2023年第9期93-97,共5页Agriculture and Technology

基　　金：2022年辽宁省农业地方标准制修订项目计划(项目编号:2022257);沈阳市科技局科学技术计划项目(项目编号:21-108-9-37)。

摘　　要：为了建立山羊痘病毒(Goat pox virus,GTPV)和绵羊痘病毒(Sheep pox virus,SPPV)快速荧光PCR检测方法,本研究对2种病毒的保守基因P32基因在GeneBank上进行Blast比对,设计合成特异性荧光PCR引物和探针,构建了该病原特异性基因P32的重组质粒。建立了可以同时检测山羊痘病毒和绵羊痘病毒荧光PCR方法,对方法的特异性、敏感性和重复性进行研究,结果显示该方法具有高度的特异性,除了识别山羊痘病毒和绵羊痘病毒基因组外,对羊的基因组及山羊和绵羊常见病原的基因组均不发生交叉反应。在敏感性和重复性实验中,该方法对山羊痘病毒和绵羊痘病毒的检测限为1000Copies·mL-1,变异系数小于3%,因此具有优良的敏感性和稳定性。用该方法检测实验室模拟制备的样品,检测结果与预期相符合。

关 键 词：山羊痘病毒 绵羊痘病毒 荧光PCR方法 

分 类 号：S852.654[农业科学—基础兽医学]