扶正解毒方含药血清对小鼠肺泡巨噬细胞和II型肺泡上皮细胞共培养的炎症调控作用研究  

作　　者：陈剑坤 卢月 李际强 张忠德 刘云涛 杨荣源[1] 

机构地区：[1]广州中医药大学第二附属医院,广东广州510120 [2]广东省中医院传染病重点研究室,广东广州510120

出　　处：《时珍国医国药》2023年第3期554-558,共5页Lishizhen Medicine and Materia Medica Research

基　　金：国家重点研发计划(2022YFC0867400);国家中医药管理局中医药创新团队及人才支持计划项目(ZYYCXTD-D-202203);广东省中医药局科研项目(20215009);广东省中医院朝阳人才科研专项资助(ZY2022KY10,ZY2022YL04)。

摘　　要：目的通过探讨扶正解毒方在小鼠肺泡巨噬细胞和II型肺泡上皮细胞共培养体系中的炎症调控作用,阐明其治疗急性肺损伤的机制。方法选取SD大鼠20只灌胃扶正解毒方颗粒剂,连续7d后处死大鼠制备扶正解毒方含药血清;采用LPS 1μg/mL对小鼠肺泡巨噬细胞MH-S进行预处理,6h后给予不同浓度扶正解毒方含药血清干预,采用MTT法检测MH-S的增殖情况;在Transwell中建立小鼠肺泡巨噬细胞MH-S(上室)和II型肺泡上皮细胞MLE-12(下室)共培养体系,24h后给予1μg/mL LPS和(或)不同浓度(5%、10%、15%)扶正解毒方含药血清干预,分别采用分光光度计、ELISA、荧光定量PCR、Western-blot测定小鼠II型肺泡上皮细胞层通透性、共培养上清中氧化应激分子、炎性细胞因子、炎性介质mRNA水平、PI3K/Akt蛋白表达。结果不同浓度的扶正解毒方均抑制LPS诱导的小鼠肺泡巨噬细胞增殖(P<0.05);共培养体系中,各浓度的扶正解毒方含药血清均可降低小鼠II型肺泡上皮细胞通透性(P<0.001),中、高剂量组能够下调共培养上清中氧化应激分子NO和ROS、炎症因子IL-6、TNF-α和IL-1β以及炎症介质iNOS、COX-2和MCP-1 mRNA水平(P<0.05),此外含药血清能够抑制共培养体系小鼠肺泡巨噬细胞中的PI3K/Akt信号通路磷酸化(P<0.05)。结论在LPS诱导小鼠肺泡巨噬细胞和II型肺泡上皮细胞共培养体系中,扶正解毒方可通过抑制PI3K/Akt信号通路活化,下调氧化应激分子和炎症介质表达,抑制M1型巨噬细胞增殖,改善II型肺泡上皮细胞屏障功能。

关 键 词：扶正解毒方 肺泡巨噬细胞 II型肺泡上皮细胞 急性肺损伤 炎症 

分 类 号：R285.5[医药卫生—中药学]