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机构地区:[1]辽宁中医药大学附属医院,辽宁沈阳110032 [2]辽宁中医药大学,辽宁沈阳110847
出 处:《时珍国医国药》2023年第3期597-600,共4页Lishizhen Medicine and Materia Medica Research
基 金:辽宁省自然科学基金(201602482);辽宁省沈阳市科技计划项目(18013083);辽宁中医药大学自然科学类重点项目(2021LZY052)。
摘 要:目的利用细胞、分子生物学技术,采用实时荧光定量反转录聚合酶链反应(Real-time PCR,RT-PCR)、蛋白免疫印迹(Western Blot,WB)、酶联免疫吸附测定(enzyme linked immunosorbent assay,Elisa)检测方法,观察左归丸组与右归丸对大鼠膝骨关节炎软骨细胞、韧带组织的作用机制及细胞凋亡的影响,并讨论左归丸组与右归丸治疗膝骨关节炎的作用机制。方法SPF级8月龄Wistar雌、雄大鼠共40只,使用随机数字表法随机选取雌雄各4只作为正常组(A组),剩余大鼠用10%浓度木瓜蛋白酶溶液进行造模成功后作为膝骨关节炎模型组,将模型大鼠雌雄区别后再次随机分为4组,分别为模型组(B组)、左归丸组(C组)、右归丸组(D组)、硫酸氨基葡萄糖组(E组),连续治疗4周后于末次治疗后,对大鼠行腹主动脉取血,制备血清,取下部分大鼠的整体右膝关节及其余大鼠的膝关节软骨、韧带,HE染色方法观察大鼠膝关节软骨病理变化;对软骨、韧带共同使用RT-PCR法、WB法检测其MyD88、NF-κBp65的表达水平;ELISA法检测大鼠分离血清中TNF-α的含量。采用SPSS 22.0软件包对检测结果进行方差分析,P<0.05有统计学意义。结果(1)膝关节病理切片结果:经左、右归丸治疗后KOA症状缓解。(2)RT-PCR检测结果:软骨和韧带组织中,较模型组对比左归丸组与右归丸组MyD88、NF-κBp65表达含量明显减少(P<0.05)。(3)Western Blot检测结果:软骨和韧带组织中,较模型组对比左归丸组与右归丸组MyD88、NF-κBp65蛋白含量明显降低(P<0.05)。(4)Elisa法检测结果:各组大鼠血清中,左归丸组与右归丸组TNF-α表达水平明显降低(P<0.05)。结论左、右归丸还能通过补肾法抑制TLR4/MyD88/NF-κB信号通路活化,降低MyD88、NF-κBp65、TNF-α的表达,达到保护软骨细胞及韧带组织,控制炎症,促进受损组织恢复的目的。
关 键 词:左归丸 右归丸 骨关节炎 TLR4/MyD88/NF-κB 信号通路
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