原代大鼠骨髓间充质干细胞的改良培养及鉴定  

An improved method about culture and identification of primary rat bone marrow derived mesenchymal stem cells

作　　者：马华根 刘海琴 唐元瑜[3] MA Hua-gen;LIU Hai-qin;TANG Yuan-yu

机构地区：[1]北京中医药大学中医学院,北京102488 [2]福建中医药大学中西医结合学院,福州350122 [3]福建中医药大学中医学院,福州350122

出　　处：《中国应用生理学杂志》2022年第6期735-738,共4页Chinese Journal of Applied Physiology

基　　金：国家自然科学基金资助项目(81072714);福建省自然科学基金资助项目(2017J01545)。

摘　　要：目的:改良原代大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)的分离培养方法。方法:基于“干细胞生态位”原理,采用全骨髓贴壁法结合骨片消化法分离培养原代大鼠BMSCs。通过细胞形态学观察、细胞表面标志物CD分子检测以及定向诱导分化实验对目的细胞进行鉴定。结果:所培养的细胞形态为细长梭形,其融合后呈典型的“涡旋状”紧密排列,且细胞增殖迅速,原代培养5~6 d即可达到融合状态,按1∶3比例连续传代到第8代时,细胞形态仍基本保持不变;第4代细胞的间充质干细胞表面标志物CD90、CD29、CD73以及造血干细胞表面标志物CD45、CD34、CD11b/c的阳性表达率分别为89.0%、98.3%、64.2%、3.5%、5.6%、24.7%;定向诱导分化实验表明目的细胞具有良好的成脂、成骨分化潜能。结论:本研究基于“干细胞生态位”原理,成功建立了一种高效稳定的原代大鼠BMSCs分离培养方法。

关 键 词：骨髓间充质干细胞 干细胞生态位 改良培养 免疫表型 干细胞分化 

分 类 号：R329.21[医药卫生—人体解剖和组织胚胎学]