梨酵母双杂交cDNA文库的构建与鉴定  

Construction and Identification of cDNA Library of Yeast Two-hybrid of Pear

作　　者：龚宏 易善萍 聂显双 刘政[2] 李谢雨 杨立[2] 程寅胜 张义[1] 伍涛[2] GONG Hong;YI Shanping;NIE Xianshuang;LIU Zheng;LI Xieyu;YANG Li;CHENG Yinsheng;ZHANG Yi;WU Tao

机构地区：[1]长江大学园艺园林学院,湖北荆州434025 [2]湖北省农业科学院果树茶叶研究所,武汉430064 [3]华中农业大学园艺林学学院,武汉430070

出　　处：《中国南方果树》2023年第3期126-129,共4页South China Fruits

基　　金：国家梨产业技术体系(CARS-28);国家重点研发计划2020YFB1000202;湖北省农业科技创新中心重大研发项目(2020-620-000-002-05)资助。

摘　　要：酵母双杂交是检测蛋白质之间相互作用的有效手段。构建梨酵母双杂交cDNA文库,能为利用酵母双杂交技术探究梨基因功能的互作机制提供技术支撑。本研究以沙梨主栽品种“圆黄”梨的叶片和果肉为材料,采用Trizol法提取其RNA,利用SMART技术经LD-PCR合成全长cDNA,通过同源重组法与pGADT7载体连接,再电转化至大肠杆菌菌株。经检测,构建的cDNA文库滴度为1.76×10^(8)cfu/mL,文库片段插入阳性率为100%,片段长度主要分布在600~1 500 bp。该研究结果表明,构建的cDNA文库质量较高,完整性较好,能为后续利用酵母双杂交技术鉴定基因的互作蛋白奠定基础。

关 键 词：梨 CDNA文库 酵母双杂交技术 

分 类 号：S661.2[农业科学—果树学]